А чубуков на обочине: Заготовка черенков (чубуков) винограда осенью для посадки

Содержание

Заготовка черенков (чубуков) винограда осенью для посадки

Многих садоводов и виноградарей-любителей интересует вопрос, как правильно заготовить черенки винограда.

А.М. Негруль в своей книге «Виноградарство с основами ампелографии и селекции» (1952) дает следующие советы:

  • Заготовка саженцев винограда выполняется с лучших здоровых кустов.
  • Главная задача — получение качественных черенков на зиму.
  • В данном процессе важную роль играет своевременное вертикальное подвязывание побегов, прищипка пасынков при загущении кустов (оставляем два листа), чеканка и удаление невызревших и лишних побегов.

Заготовка чубуков винограда осенью или весной?

Заготовка вызревших черенков (побегов) плодоносных или подвойных сортов выполняется при обрезке винограда осенью после опадения листвы и до наступления осенних заморозков или весной, до сокодвижения.

В южных районах, где виноград не укрывается, оптимальным временем для заготовки чубуков является весна.

В других регионах — осень.

Основные правила заготовки черенков винограда

  • Лозу нарезают длинной 120—140 см, связывают в пучки и укладывают в подвал (хранилища) или прикапывают (см. Хранение черенков винограда).
  • Некачественные побеги: кривые, зеленые, поврежденные градом или низкими температурами, вредителями или болезнями для черенкования негодны.
  • Отдельно обращайте внимание, чтобы древесина черенка не была повреждена болезнями (некроз, короткоузлие, и пр.).
  • Вызревшая лоза имеет характерный сорту цвет, при изгибании лозы слышен типичный треск от разрыва пробковых волокон. А еще, если лозу зажать в руке, она кажется теплой, в то же время, если взять зеленый, невызревший побег, он прохладный на ощупь.
  • Сердцевина чубука побегов не должна быть более трети диаметра побега.
  • Дистанция между почками не должна превышать 10—12 см.
  • Диаметр лозы должен быть от 6 до 11 мм.
  • Диафрагма у зрелого побега имеет плотную перегородку, а у незрелого она губчатая и неровная.

Уровень вызревания побегов можно установить йодной реакцией. Чем лучше созрел побег, тем выше в нем процент содержания крахмала. Его количество можно определить погружением свежесрезанных концов черенка 1 % раствор йода. Йод окрашивает кристаллы крахмала в тёмно-фиолетовый цвет. Вызревшие чубуки дают почти черное окрашивание, а невызревшие — слабо-фиолетовое.

Для заготовки саженцев лучшей является средняя часть лозы, выросшего на двухлетнем побеге, а также хорошо созревшие пасынки на них.

Зеленые верхушки побегов, поперечный срез которых менее 5 мм, жирующая лоза с удлинёнными междоузлиями и порослевые побеги для заготовки на саженцы не годятся.

Во время заготовки лозу режим по междоузлию, очищаем ее от пасынков, усиков, и зеленых верхушек, связываем в пучки.

На каждую охапку вешаем этикетку с указанием сорта.

Поделитесь своим опытом в коментариях или нашей группе Фейсбук https://www.facebook.com/groups/840750949432929/, как Вы заготовливаете лозу. Проводите ли закаливание первыми заморозками?

Автор книги описывает, как проводится заготовка черенков винограда на зиму в промышленных целях, но таким же способ мы заготавливаем черенки весной или осенью в домашних условиях для сада или дачного участка.

Понравилась статья? Подписывайтесь на канал и расскажите друзьям.

Заготовка и хранение черенков винограда

ВЫРАЩИВАНИЕ ПОСАДОЧНОГО МАТЕРИАЛА

Виноград обычно размножают выращиванием саженцев в школках из черенков стандартной длины (55— 70 см) и толщиной не менее 5 мм, а также путем разных видов отводков от имеющихся на участке кустов.

Заготовка и хранение черенков

Черенки, или, как их еще называют, чубуки, заготавливают осенью из выросших за лето, хорошо вызревших и совершенно здоровых побегов, которые имеют однородную окраску и при сгибании потрескивают. Черенки для посадки не годятся, если они очень тонкие, слабо вызревшие, поврежденные грибными болезнями и вредителями, жирующие (очень толстые, свыше 12 мм), а также нарезанные с бесплодных кустов.
Листья с виноградного растения в северных районах Донбасса не всегда успевают осыпаться дю наступления морозов. Поэтому черенки можно заготавливать раньше этого времени. Необходимо только убедиться, что лоза вызрела. Это наступает примерно во второй половине октября.
Срезанную лозу качественных сортов винограда, заготавливаемую для зимнего хранения, очищают от пасынков и усиков, режут на чубуки стандартной длины — 50—70 см (рис. 1). Но лучше нарезать лозу длиной 120—140 см. Она зимой лучше сохраняется и при нарезке черенков весной меньше дает отходов. Связав чубуки в пучки (по сортам), к каждому из них прикрепляют этикетку с названием сорта. Ее следует писать простым карандашом. Сразу же после этого пучки укладывают на зимнее хранение.

Рис. 1. Заготовка черенков на хранение: а — необработанная лоза, б— черенок, подготовленный к хранению

Черенки можно хранить в подвалах или в ямах, вырытых прямо на участке. Укладывают их горизонтально или вертикально, плотно пересыпая увлажненным песком или прожаренными опилками. Если этих материалов нет, используйте структурную почву, заполняя ею пространство между черенками в пучке, а также между пучками. При укладке черенков на хранение их нужно обязательно обработать 5%-ным раствором железного купороса. Это предохранит их от заплесневения.
Я лично успешно храню чубуки в траншее (рис. 2). Чтобы избежать сильного нагревания черенков и колебания температуры, копаю яму с северной стороны сарая, расположенного на приусадебном участке. Ширина ямы 1,5 м, глубина 0,7 м, а длина определяется в зависимости от количества чубуков, подлежащих хранению. Стены траншеи опыливаю гексахлораном или обрызгиваю 5%-ным раствором извести, на дно кладу обрезки лозы, вспрыснутые 5%-ным раствором железного купороса. Затем укладываю в траншею небольшие пучки, черенков. Потом засыпаю ее землей с таким расчетом, чтобы сверху получился двускатный холм, который должен выходить у основания за пределы траншеи. Вокруг холма прокапываю канавку для стока талой и дождевой воды.
При хранении черенков в погребе также пересыпаю их слегка влажным песком, заполняя им все свободное пространство между пучками и черенками. Температура в помещении не должна превышать +6°.
Чтобы песок не пересыхал, время от времени его нужно увлажнять, а при избытке влаги в погребе —проветривать помещение. Это предупреждает появление на черенках плесени.
В связи с распространением пятнистого некроза в последние годы применяют способ хранения черенков без переслаивания песком. В этом случае штабель чубуков обшивают с боков и сверху камышовыми матами и укрывают опилками для предохранения от подмерзания и высушивания. Но этот метод подходит больше к промышленным хозяйствам.

Рис. 2. Траншея для хранения черенков

Лучшими считаются черенки, заготовленные ранней весной, до начала сокодвижения. Они хорошо сохраняют свежесть и жизнеспособность.
Чубуки, заготовленные на стороне или находившиеся после обрезки продолжительное время на дворе, необходимо перед закладкой на хранение поместить на день-два в воду.
Многие виноградари-любители приобретают черенки и сажают их у себя на участке. Но такие черенки часто не принимаются, так как были некачественными. Чтобы избежать неудачи, необходимо перед посадкой чубуки проверить. У хороших черенков при снятии с них ножом немного коры древесина имеет ярко-зеленую окраску. При поперечном срезе глазка острым ножом или бритвой почка внутри глазка должна быть зеленого цвета. Это свидетельствует о том, что она здорова. Если внутренность глазков потемневшая, коричневого цвета, значит, почки погибли- такие черенки к посадке не пригодны.

Три способа как хранить черенки винограда зимой (фото)


Для того чтобы размножить сорт уже имеющегося на вашем участке винограда, или поделиться со знакомыми качественным посадочным материалом, или даже заработать денег, нужно освоить способы укоренения виноградной лозы. Многолетний опыт показал, что наивысший процент приживаемости и наибольший прирост вегетирующих кустов последующих лет получается из собственного посадочного материала. На приживаемость и дальнейшее развитие виноградного саженца существенно влияет продолжительность пересылки почтой, разница климатических, почвенных и других условий произрастания и т. д. 


Когда же растение «появилось на свет» и пересажено на постоянное место в пределах одного участка, картина совсем другая, особенно если речь идет об органическом винограднике. Существует много способов укоренения виноградной лозы. Это и отводкование китайским способом, и комнатное черенкование «на воде», черенкование в стаканчиках, во мху, опилках и т. д. Однако наиболее практична и менее хлопотная виноградная школка под открытым небом.


Как выбрать черенок винограда для хранения зимой и дальнейшей его посадки в школку


Для выращивания корнесобственных саженцев в школке используются однолетние трехглазковые черенки, нарезанные осенью с плодоносящих кустов при обрезке. Черенки предпочтительнее нарезать со средней части лозы, так как именно там почки наиболее развиты и более плодоносны. Выбирая лозы для нарезки черенков, которые в недалеком будущем станут саженцами, в первую очередь следует обращать внимание на степень их вызревания. Обычно вызревшая лоза имеет яркий светло-коричневый цвет, твердые ткани и при сгибании потрескивает. Невызревшая лоза в большинстве случаев имеет грязно-зеленый цвет и сморщенную поверхность — такая лоза для черенков не годится. Куст, из которого нарезают черенки, не должен быть поражен грибковыми заболеваниями, такими как милдью, оидиум и др. Лоза на таком кусте, как правило, имеет серо-бурые пятна, специфический запах и полностью или частично невызревшая. Такую лозу при обрезке необходимо унести с виноградника и сжечь, оставляя на кусте только здоровые побеги. Эти здоровые побеги также можно использовать и для нарезки черенков. Золу после сжигания больных лоз можно использовать для удобрения винограда и других культур, но пораженную лозу, ни в коем случае нельзя использовать в компосте и мульче по вполне понятным причинам. Только предав ее огню, можно извлечь из такой лозы пользу для виноградника. Также непригодна для черенкования лоза с механическими повреждениями коры, почек и сердцевины. Сроки нарезки черенков обычно совпадают с осенней обрезкой винограда. Для укрывного виноградника это обычно конец октября — начало ноября (в центральных и северных регионах Украины), в основном после первых осенних заморозков или естественного листопада, но не раньше, так как в октябре происходит отток питательных веществ из листьев в древесную часть куста, и терять эти вещества ни к чему. При заготовке черенков нужно учитывать такое важное обстоятельство, как сохранение влаги в тканях. Считается, что потеря влаги ниже 35 % от сырого веса черенков приводит к гибели 50 % почек. Черенок, пролежавший на солнце без укрытия 5 часов, имеет нулевую приживаемость. Во избежание такого конфуза черенки сразу же после нарезки помещаем на 6-8 часов в воду, связываем в пучки, немного проветриваем и, обработав с помощью ручного опрыскивателя «фитодоктором» по инструкции, укладываем на хранение. И еще, как показала практика, лучше сохраняют влагу при хранении черенки двойной длины. То есть, нарезаем их на 6-8 глазков, а уже весной перед посадкой разрезаем их на трехглазковые.


Существует много способов хранения заготовленных черенков винограда зимой.


Какие-то вы со временем попробуете сами, о результатах других услышите от знакомых виноградарей. Но мы остановимся на двух, самых надежных и простых. Ну и, конечно же, результативных.


Способ первый хранения черенков винограда: подготавливаем черенки так, как было сказано выше, и связанными в пучки укладываем в полиэтиленовый пакет, пересыпая влажными опилками. Пакет завязываем неплотно, оставив возможность для дыхания черенков. После этого пакет с черенками помещаем на длительное хранение в погреб. Температура хранения черенков должна быть в пределах 2…4°С. Обычно погреб, который выкопан по стандартной схеме, вполне соответствует этим требованиям. Плюс-минус пара градусов допустима и существенно не повлияет на хранение черенков. Нужно на всякий случай подчеркнуть, что для хранения черенков винограда зимой лучше использовать погреб, но, ни в коем случае не подвал многоэтажного дома, где наверняка проходят теплокоммуникации. Температура в таких подвалах, как правило, намного выше, чем необходимо для хранения черенков. В таких условиях они начинают активно дышать и растрачивают питательные вещества, в итоге в лучшем случае получатся очень слабые саженцы. Но если температура в подвале или гараже соответствует указанной выше, то почему же не хранить там саженцы? Только не забывайте иногда наведываться и проверять влажность опилок. Подсохли — сбрызните водой, но не переусердствуйте, опилки должны быть влажными, но не мокрыми. И не забудьте на каждый пучок черенков прикрутить бирку с названием сорта винограда во избежание пересортицы.


Второй способ хранения виноградных черенков подойдет тем, кто заготавливает большое количество посадочного материала, а также для дачников, которые живут в городе и не имеют на участке погреба, а подвал есть, но теплый. Суть этого способа в том, что материал для укоренения хранится прямо на участке в специально подготовленной траншее. Выбирая место под траншею, предпочтение нужно отдавать защищенным местам с легкой возвышенностью: у забора, сарая или других хозяйственных построек. Возвышенность нужна для того, чтобы талая вода или дождь не заливали хранилище с черенками. Препятствием для посторонней влаги может служить и канавка, выкопанная вокруг зимовальной траншеи с отводом воды в сторону естественного уклона. Если не полениться и прокопать канавку длиннее, то отведенную от ямы с черенками воду можно направить к размеченным на будущее грядкам — пусть запасают влагу на лето. Размер зимовальной траншеи зависит от количества заготовленной лозы. Обычно глубина такой траншеи — 50 см, а длина и ширина могут быть произвольными. Нарезанные черенки, предварительно связанные в пучки с бирками, укладываем на дно зимовальной траншеи, предварительно посыпав дно 5-сантиметровым слоем влажного песка. Заполняем хранилище пучками черенков, при этом стараясь плотно укладывать пучок к пучку и насыпаем сверху 7-8 см влажного (но не мокрого!) песка. 


Напоследок насыпаем поверх песка 25-30 см земли, которая была вынута из ямы. Просто и удобно. Если есть желание, то над ямой можно поставить легкий навес — например, кусок рубероида или лист шифера. Наклоненный вниз край шифера можно разместить над канавкой для отвода воды, и она потечет к нашим грядкам. Лишняя влага для грядок не помеха, тем более если наш огород ведется по органическому принципу, то грядки как губка впитают драгоценную для них влагу. А нам потом меньше поливать.


Третий способ хранения виноградных черенков, необычайно простой, но действенный. Подходит он больше для тех, кто хочет укоренить немного черенков, так как храниться они будут в обычном бытовом холодильнике. «Немного черенков» — конечно, понятие относительное. В обычном бытовом холодильнике можно без стеснения для продуктов хранить около 200 черенков винограда, и это, поверьте, немало для дачника. Кстати, возьмите на заметку, так же можно успешно хранить семенной картофель. После нарезки заворачиваем черенки во влажную чистую натуральную ткань, укладываем в чистый полиэтиленовый пакет и кладем на нижнюю полку холодильника. 


В пакете оставляем небольшое отверстие для доступа воздуха и периодически, по мере высыхания тряпочки, смачиваем ее водой. Иногда может возникнуть необходимость поменять тряпочку — запах вам все подскажет. Главное в этом способе — холодильную камеру с морозильной не перепутать, а то всякое бывает. С наступлением весны начинаем готовиться к посадке саженцев винограда в школку.

Откуда берется виноград?

«Виноградную косточку в теплую землю зарою и лозу поцелую, и спелые гроздья сорву. ..»

Помните? Забудьте. На самом деле, семенами виноград размножают только ученые в процессе селекции, а весь винодельческий мир давно уже использует черенки. 

Черенок — это кусок виноградной лозы, так называемый чубук, длиной около 40 см, заготовка их происходит в процессе обрезки виноградника в декабре-феврале. Черенок должен быть достаточно вызревшим, не зеленым побегом, нужной толщины, правильной длины и обязательно с взрослой, плодоносящей лозы. Нарезанные чубуки отправляют в холодильник, где они и ждут весны при температуре +3-5°, пересыпанные песочком и в условиях контролируемой влажности (нельзя дать им пересохнуть).

В начале апреля мы их будим и отправляем на кильчевание – опускаем «пяточками» (так называется нижняя часть чубука) сначала в раствор с препаратами для корнеобразования, а затем укладываем друг за дружкой в подготовленную яму, глубиной около метра, накрываем ее сверху пленкой, присыпаем землей и ждем, пока черенки не нарастят корни. Как только корневых отростков образуется достаточное количество, черенки из ямы вытаскиваем, заливаем верхнюю часть парафином (делается это для того, чтобы искусственно задержать рост побегов – если почка выйдет раньше, чем укрепятся корни, весеннее солнце ее сожжет) и высаживаем в школку – на двухрядные грядки, поверхность которых покрыта пленкой.  Дальше все, как у взрослых: подкармливаем, окучиваем, обламываем и чеканим. А ближе к осени лишаем полива, чтобы к ноябрю-декабрю выкопать сильный, здоровый, сформировавшийся и готовый к посадке саженец с мощными разветвленными корнями. И сразу отправить его на посадку. Ну или на продажу. 

Это стандартная схема работы с корнесобственными саженцами, в случае же если мы хотим схитрить и использовать корни одного сорта, а верх другого, то такой саженец называется привитым и ко всем вышеперечисленным процедурам  его подготовки добавляется еще и прививка – механическое сращивание двух сортов. Дело интересное, но хлопотное, особенно при больших объемах. Так что мы пока обходимся без прививок, но планируем начать работать и с ними.

ПРЕДЛОЖЕНИЕ МНОЖЕСТВО ВОПРОСОВ ВЫБОРА Выберите правильные альтернативы: 1. Имя драматурга

Ответ — Вопрос из спектакля «Предложение», драматург которого — Антон Чехов.

Задан вопрос : НЕСКОЛЬКО ВОПРОСОВ ВЫБОРА

Выберите правильные альтернативы.

Ответ: Правильные варианты выделены жирным шрифтом.

1.Имя драматурга, написавшего «Предложение» —

(а) Стефан Чубуков

(б) Лев Толстой

(в) Антон Чехов

(г) Иван Ломов

2. Ф.И.О. Чехова. was-

(а) Антон Ломов Чехов

(б) Антон Степанович Чехов

(в) Антон Павлович Чехов

(г) Антон Фодор Чехов

3. Пьеса «Предложение» также известна. as-

(а) «Прекрасное предложение»

(б) «Предложение о браке»

(в) «Необычное предложение»

(г) «Предложение Ломова»

4.«Предложение» — это a-

(a) одноактная пьеса

(b) двухактная пьеса

(c) трехактная пьеса

(d) пятиактная пьеса

5. жанр спектакля —

(а) романтическая комедия

(б) фарс

(в) пародия

(г) политическая сатира

6. Сеттинг спектакля —

( а) сельский дом

(б) сельский рынок

(в) дача Ломова

(г) дача Чубукова

7.Действие спектакля происходит по адресу-

(а) городской дворец Чубукова

(б) дача Ломова

(в) дача Чубукова

(г) дом дяди Ломова

8. Чубуков а-

(а) землевладелец

(б) юрист

(в) купец

(г) врач

9. Когда прибыл Ломов, Чубуков был удивлен его-

(а) вечерний костюм

(б) сердцебиение

(в) застенчивость

(г) наглость

10.Чубуков обращается к Ломову как:

(а) черт

(б) крестьянин

(в) ангел

(г) угол

11. «Нельзя забывать о своих соседях. ” Здесь упомянуты «соседи» —

(а) Ломовы

(б) Чубуки

(в) Наталья

(г) Чеховы

12. Ломов пошел к своему соседу, в дом Чубукова —

( а) занять деньги

(б) для разрешения спора

(в) сделать предложение руки и сердца

(г) пожаловаться

13. Ломов приходит в дом Чубукова —

(а), чтобы предложить своей дочери

(б) как хорошие соседи

(в) для официальной встречи

(г), чтобы занять денег у Чубукова

14. Наталья Степановна — дочь —

(а) Ломов

(б) Чубуков

(в) Чехов

(г) Василевич

15. На Ломове —

(а) черный костюм

(б) фрак-пиджак и белые перчатки

(в) белый пиджак и белые перчатки

(г) свадебный костюм

16.Цвет перчаток Ломова —

(а) серый

(б) красный

(в) синий

(г) белый

17. Чубуков считает, что Ломов дошел до —

(а) украсть его землю

(б) занять деньги

(в) оскорбить его

(г) показать его платье

18. «… Я должен принять решение». Лицо —

(а) Чубуков

(б) Чехов

(в) Наталья

(г) Ломова.

19. «… Хотя я этого, конечно, не заслуживаю ….». Здесь «это» означает —

(а) какой-то обед

(б) помощь Натальи

(в) поговорить с Натальей

(г) Помощь Чубукова

20. Сколько толчков в левый бок делает Ломов во сне? —

(а) 30

(б) 20

(в) ) 10

(г) 5

21. Ломов уже —

(а) 40 лет

(б) 35 лет

(в) 30 лет

(г) 45 лет

22.Для Ломова критический возраст для вступления в брак —

(а) 35 лет

(б) 25 лет

(в) 40 лет

(г) 50 лет

23. Ломов прыгает во сне, как —

(а) кролик

(б) сумасшедший

(в) лисица

(г) собака

24. Чубуков считает, что Ломов пришел —

(а) одолжить деньги

(б) одолжить деньги

(в) показать его новое платье

(г) поприветствовать его по случаю Нового года

25. Тот, кого называют любовным котом —

(а) Ломов

(б) Угадай

(в) Соковыжималка

(г) Наталья

26. Ломов страдает —

(а) ходьба во сне

(б) бессонница

(в) сердцебиение

(г) высокое кровяное давление

27. «Иди; Купец пришел за своим товаром ». — Здесь упоминается купец —

(а) Чубуков

(б) Ломов

(в) косилка

(г) фермер

28.Термин «неглиже» означает —

(а) платье

(б) свободное платье

(в) фартук

(г) рубашку

29. Наталья обстреливала-

( а) фасоль

(б) горох

(в) ячмень

(г) луга для сушки.

30. Наталья попросила Ломова —

(а) завтрак

(б) обед

(в) ужин

(г) ужин

31. Ломов знает семью Натальи —

(а) ) с детства

(б) за последние двадцать лет

(в) за последние тридцать лет

(г) ненадолго

32. По словам Ломова, Чубуковы и Ломовы были очень-

(а) конкурентоспособными

(б) ревнивыми

(в) дружелюбными

(г) враждебными

33. Волки Мидоуз касаются-

(a) березовые леса

(b) дубовые леса

(c) яблони

(d) кленовые леса

34. Oxen Meadows —

(a) березовые леса и болотные топи

(b) Обгоревшее болото

(c) Обгоревшие леса и Обгоревшее болото

(d) Лес Дунсинан и Бирнам

Пространственная структура сигнальных систем клетки

Phys Biol.Авторская рукопись; доступно в PMC 2015 2 февраля.

Опубликован в окончательной редакции как:

PMCID: PMC3870181

NIHMSID: NIHMS514183

Ruth Nussinov

1 Программа фундаментальных исследований, SAIC-Frederick, Inc., Программа по раку и воспалению, Национальный институт рака, Фредерик, Мэриленд 21702

2 Sackler Inst. Молекулярной медицины, Департамент генетики человека и молекулярной медицины, Медицинская школа Саклера, Тель-Авивский университет, Тель-Авив 69978, Израиль

1 Программа фундаментальных исследований, SAIC-Frederick, Inc., Программа рака и воспаления, Национальный институт рака, Фредерик, Мэриленд 21702

2 Sackler Inst. of Molecular Medicine, Department of Human Genetics and Molecular Medicine, Sackler School of Medicine, Тель-Авивский университет, Тель-Авив 69978, Израиль

Окончательная отредактированная версия этой статьи доступна в Phys Biol. См. другие статьи в PMC, в которых цитируется опубликованная статья.

Abstract

Пространственная структура клетки высокоорганизована на всех уровнях: от небольших комплексов и сборок до локальных нано- и микрокластеров и до глобальных микрометровых масштабов поперек и между клетками.Мы предполагаем, что эта многомасштабная пространственная организация клетки также организует передачу сигналов и координирует клеточное поведение. Мы предлагаем новый взгляд на пространственную структуру сигнальных систем клетки. Этот новый взгляд описывает передачу сигналов в клетках в терминах динамических аллостерических взаимодействий внутри и между отдельными, пространственно организованными временными кластерами. Кластеры меняются во времени и пространстве и имеют масштаб от нанометров до микрометров. Если рассматривать эти масштабы длины, первичными факторами пространственной организации являются домены клеточных мембран и актиновый цитоскелет, оба также очень динамичны.Ключевой задачей является понимание взаимодействия этих множественных масштабов, связать его с физико-химической основой конформационного поведения отдельных молекул и, в конечном итоге, связать его с клеточной функцией. В целом, наша предпосылка состоит в том, что в этих масштабах передача сигналов клеток должна рассматриваться не в первую очередь как последовательность контролируемых диффузией молекулярных столкновений, а вместо временных, управляемых аллостерией взаимодействий, реформирующих кластеры.

Ключевые слова: кластеры , нанокластеры Ras, цитоскелет, конформационные состояния, аллостерические, многомасштабные, мультипротеиновые, мультипротеиновые, колокализация, секвестрация, скаффолдинг, популяционный сдвиг, конформационный отбор

Введение

Все больше и больше данных Подтвердите: в клеточных молекулах, которые разделяют функциональный кластер.Это относится к мембранным плотам; для рецепторов; для молекул, закрепленных в мембране, таких как нанокластеры белка Ras [1, 2]; для белков цитоскелета и связанных с ними адаптеров; для мультиферментных комплексов, таких как убиквитин-лигазы MAPK и E3; для «клеточных фабрик» (отдельные участки в клетке, где сконцентрированы и закреплены ко-функциональные ферменты, такие как РНК-полимеразы при транскрипции [3, 4, 5] и регуляция гена hGH [6]) и многое другое. Все чаще данные также подтверждают: кластеры динамичны.Например, кластеры в клеточной мембране динамически изменяют свой белковый и липидный состав и расположение; фабрики изменяют количество копий ферментов и состав кофакторов, адаптируясь к конкретному клеточному положению и состоянию клетки; мультиферментные комплексы, такие как лигазы E3, изменяют компоненты аппарата в зависимости от состояния клеточного цикла и окружающей среды [7, 8]. Вместе они указывают на то, что состав, расположение, структура и молекулярные взаимодействия кластеров меняются со временем.Кластеры организованы в нескольких масштабах, от нанометрового масштаба многомолекулярных кластеров внутри клетки до микрометрового масштаба в межклеточной передаче сигналов в иммунологических синапсах [9]. В совокупности формирующаяся картина представляет собой кластеры, контролируемые средой и сигналом, с флуктуирующими паттернами в различных масштабах размера, соединяющими прямые и опосредованные липидами, РНК или ДНК непрямые белок-белковые взаимодействия. Предварительная организация, когда молекулы пространственно и динамически заранее позиционируются для продуктивной ассоциации, охватывает долгосрочные межклеточные паттерны.Это происходит в мембранных рафтах, где динамические взаимодействия белков могут быть опосредованы липидами, и в актиновом цитоскелете, который контролирует динамическую пространственную организацию и опосредует дальнодействующие взаимодействия. Это также имеет место в многочисленных кластерах, состоящих из десятков или сотен молекул, как в случае Foxp3, который образует комплексы 400-800 кДа или больше с 361 ассоциированным белком, идентифицированным с помощью масс-спектрометрии, ~ 30% из которых являются транскрипционными. факторы [10]. Здесь наш центральный тезис заключается в том, что координация действий и ответов клетки на окружающую среду возникает из этой предварительной организации в пределах клетки, в различных масштабах длины, готовых к развертыванию.Множественные копии кластеров, состав которых модулируется пространственным расположением кластера в ячейке, оптимизируют координацию. Динамические состояния кластерного состава и структуры предполагают, как передача сигналов изменяется во времени. Вместе они обеспечивают основу пространственной организации сигнальных каскадов, где передача сигналов осуществляется посредством межмолекулярных взаимодействий между этими кластерами и внутри них.

В то время как многочисленные статьи касались внутри- и межмолекулярной передачи сигналов (здесь цитируется только их репрезентативный набор [11–97]), очень немногие затрагивают более дальнодействующие, межкластерные и межкластерные коммуникации [9].Ключевые вопросы заключаются в том, как передача сигналов происходит через кластеры и как их пространственные, механические и химические свойства соотносятся с конформационным равновесием и эффективностью передачи сигналов. Ниже мы предполагаем, что предварительная организация белков и других биомолекул (липидов, РНК, ДНК) в кластеры и скоординированный клеточный ответ подразумевают, что передача сигналов не происходит в больших масштабах посредством контролируемых диффузией молекулярных столкновений; вместо этого передача сигналов осуществляется посредством механизма популяционного сдвига белков через динамически предварительно организованные кластеры.Вероятность взаимодействия макромолекул во время трехмерной диффузии «случайным блужданием» в открытом космосе зависит от их концентрации и способности быстро перемещаться на большие расстояния [98]. Однако суб-наномолярная концентрация факторов роста и небольшое количество мембраносвязанных лигандов, которые стимулируют клеточные ответы, предполагают, что проксимальные сигнальные молекулы взаимодействуют при низких концентрациях, по крайней мере, на ранних стадиях после стимуляции клетки. Более того, взаимодействия между свободно диффундирующими низкомолекулярными субстратами и ферментами меньше подвержены влиянию скопления из-за большой разницы в размере растворенного вещества и «скоплений» [99], предполагая, что переполненная клеточная среда все еще не подразумевает распознавание, контролируемое диффузией.С другой стороны, кластеры временны, и свободно диффундирующие молекулы могут перемещаться, образуя новые кластеры. Т.о., хотя и механизм популяционного сдвига, и механизмы случайных столкновений, управляемые диффузией, могут сосуществовать и не исключают друг друга, передача сигналов, вероятно, будет более продуктивной в заранее организованных состояниях. В сочетании с другими факторами, в первую очередь с концентрацией белков, кофакторов и метаболитов и составом мембран, они помогают понять, как, несмотря на сложность клеток, достигается координация и эффективный ответ.

Вид ячейки и ее представление

Упрощенное представление ячейки полезно. Сетевые диаграммы показывают клеточные пути, их компоненты и их связи от внеклеточных доменов мембранных рецепторов через цитоплазму к ядру. Они часто также изображают виды реакций, которые могут иметь место, когда сигнал продолжается (или подавляется). Ярким примером полезности таких диаграмм является популярный ресурс KEGG [100]. В то же время с организационной точки зрения и с точки зрения передачи сигналов сотовые диаграммы могут вводить в заблуждение, затрудняя координацию ячеек [101].Эти диаграммы упускают из виду киназный репрессор Ras (KSR), ключевого каркасного белка в путях MAP; они опускали положительную петлю белка ингибитора апоптозного белка (IAP), важной мишени для лекарственного средства; и перекрывающиеся взаимодействия белков-партнеров, которые не могут происходить одновременно, в случае MyD88 (белок 88 первичного ответа миелоидной дифференцировки). Преобладающие схематические клеточные диаграммы обычно представлены в виде узлов и ребер; они могут охватывать клетку или сосредотачиваться на сегментах, например, связанных с определенными системами или органеллами.Их часто делят на модули, чтобы выделить функциональные единицы. Внутри модулей можно ожидать, что белки будут находиться в пространственной близости; чего не может быть между модулями. Тем не менее, в действительности, чтобы клетка функционировала, состав модуля должен динамически изменяться, и белки из одного модуля должны взаимодействовать — прямо или косвенно — с белками в других модулях. Это вызывает ряд вопросов, например, как сигналы распространяются между модулями? Сигнализация требует физического взаимодействия; и эволюция вряд ли запрограммировала клеточную коммуникацию таким образом, чтобы эти белки беспорядочно диффундировали на большие расстояния в цитозоле (или органеллах) для передачи сигнала.Хотя случайный процесс может иметь место, особенно во время базальной экспрессии или диссоциации / повторной ассоциации кластеров на больших расстояниях, не ожидается, что он будет продуктивным и устойчивым, если модули находятся далеко. Действительно, трудно найти примеры взаимодействия далеких модулей. Клетки обычно воспринимаются как высокоорганизованные и структурированные, с окруженными мембраной органеллами и цитоплазмой, а также изолированными функциональными единицами, которые либо прикреплены к мембране, либо разделены и локализованы белками цитоскелета.Такой высокий уровень организации, по-видимому, несовместим с передачей клеточных сигналов, зависящей от процесса, контролируемого диффузией в масштабе микрометра. Сигнализация включает в себя сложный набор упорядоченных событий. Он может происходить из внеклеточного домена трансмембранного рецептора или из небольшой молекулы, диффундирующей через мембрану. Он должен активироваться, амплифицироваться, приводить к объединению или разветвлению путей — часто посредством некоторой комбинации событий посттрансляционной модификации [102], и полностью переноситься в ядро ​​для активации или репрессии экспрессии генов.Диффузия на большие расстояния будет препятствовать клеточному действию: в то время как объем, исключенный цитоскелетом, увеличивает скученность и, следовательно, константы межмолекулярной ассоциации, диффузия является случайным процессом, и возникает вопрос, может ли клетка позволить себе передачу сигналов, зависящих от диффузии на большие расстояния. Могут также возникнуть вопросы относительно внутримодульной передачи сигналов: хотя диаграммы изображают их как единственную копию отдельных белков, соединенных ребрами, все ли белки присутствуют всегда? И содержат ли эти модули одно или даже уникальное и постоянное количество копий на модуль? И наконец, находятся ли они в прямом контакте или контакт опосредуется другими молекулами? Такие вопросы подчеркивают разрыв между упрощенными схемами и координацией ячеек.

Необходимо регулировать сотовые процессы; а регулирование требует эффективности. Ниже мы делим клетку на макроскопические (органеллы, модули) и микроскопические (функционально связанные молекулы в этих) уровнях. Мы предполагаем, что как на макроскопическом, так и на микроскопическом уровне клетка заранее организована, включая связь между двумя уровнями. Предварительная организация не предполагает неподвижного поведения; отчетливые межмолекулярные взаимодействия колеблются, формируются и диссоциируют с короткими временами пребывания.Эти короткоживущие взаимодействия имеют достаточно большую продолжительность для прохождения сигналов, что позволяет координировать и праймировать последовательные ферменты в каталитических путях [103, 104]. В мембране сигналы могут проходить через заякоренных в мембране молекул (например, через миристоильные, фарнезильные или пальмитоильные группы), липидов (включая холестерин) и трансмембранных рецепторов. В цитозоле сигналы могут передаваться через большие сборки, такие как нуклеосомы в ядре; и, как мы здесь утверждаем, также через структурированный цитоскелет, который так же динамичен.Во всех случаях каркасные белки [103, 105, 106], которые иногда упускаются из виду на клеточных диаграммах, вероятно, играют главную роль. Белки каркаса не передают сигнал пассивно; они могут это контролировать [103]. Такой заранее организованный, но динамичный взгляд на передачу сигналов в ячейке подчеркивает эффективность, которая достигается не за счет случайных столкновений; но через механизм перемещения населения среди предварительно организованных, хотя и очень мобильных молекул, то есть аллостерию . Ландшафты кластеров могут быть весьма неоднородными по размеру, составу и форме, и эта неоднородность также определяется клеточной средой.Состояние передачи сигналов зависит от местоположения и, вероятно, связано с этой неоднородностью. Мембраны и цитоскелетные структуры уменьшают реакционное пространство на одно и два измерения соответственно и, следовательно, увеличивают вероятность возникновения молекулярных взаимодействий. Считается, что это одна из причин большого количества сигнальных молекул, связанных с мембранами и филаментами. Однако само по себе уменьшение размерности мембран и нитей лишь незначительно увеличивает вероятность взаимодействий между отдельными молекулами.Используя многомасштабную пространственную организацию клеток и конформационное поведение биомакромолекул, организует передачу сигналов и координирует скеллярный ответ.

Ниже, чтобы представить концепцию, мы начнем с относительно небольшой системы нанокластеров Ras; затем более крупные межклеточные кластеры эфрина, интегрина и иммунологических синапсов и, наконец, панклеточные структуры цитоскелета. Мы рассматриваем жизненно важную роль мембранных рафтов в передаче сигналов в этой структуре, через аллостерию, и в заключение кратко коснемся экспериментальных методов, которые можно использовать для проверки гипотез, вытекающих из концептуальной структуры, изложенной в этом обзоре.

Динамические кластеры

Типы и размеры кластеров различаются [107, 108]. Оценка размера кластера зависит от определения: в Ras размеры основаны на копиях только белка Ras; в Foxp3 также включены ассоциированные кофакторы. В среднем в нанокластере семь молекул Ras независимо от состояния активации [109, 110]; десять или более рецепторов составляют микрокластер на поверхности Т- и В-клеток [111–113] и сотни молекул в больших кластерах Foxp3 [9]. Кластеры недолговечны и очень динамичны.Ras заякорен в плазматической мембране за счет своих C-концевых липофильных посттрансляционных модификаций (PTM) и положительных зарядов. Существуют три изоформы Ras, H-Ras, K-Ras и N-Ras, с разными липидными якорями PTM, которые приводят к различным предпочтениям для мембранных доменов, подобных рафту, упорядоченным с жидкостью, и неупорядоченным жидко-неупорядоченным доменам. Фарнезилированный и дважды пальмитоилированный липидный якорь H-Ras находится преимущественно в упорядоченных доменах, обогащенных холестерином; фарнезилированный и монопальмитоилированный липидный якорь N-Ras в основном локализуется на границе раздела между упорядоченными и неупорядоченными доменами, а фарнезилированный и поликатионный липидный якорь K-Ras предпочитает неупорядоченные домены [1, 113, 114].Ras является ключевым белком в пути MAPK / ERK, который передает сигнал от рецепторных тирозинкиназ (RTK) на поверхности клетки к ядру. Внеклеточный митоген связывается с RTK. Посредством серии событий это приводит к активации Ras (GTPase) путем замены GDP на GTP. Активированный Ras связывает и активирует киназу Raf. Raf фосфорилирует и активирует MEK. MEK фосфорилирует и активирует MAPK (митоген-активируемую протеинкиназу). Динамика сборки и разборки нанокластеров Ras контролирует передачу сигналов MAPK.Хорошо известно, что образование нанокластеров Ras необходимо для активации каскада киназ MAP с помощью RTK [115]. Сгруппированные, но не индивидуально распределенные, белки Ras рекрутируют и активируют свой нижестоящий эффектор, Raf [108, 116]. Недавно было обнаружено, что ингибирование BRaf усиливает нанокластеризацию K- и N-Ras, но не влияет на H-Ras. Это важно по двум причинам. Во-первых, он дает понимание того, почему кластеризация важна для действий Ras; и во-вторых, это подчеркивает разницу между организацией и активацией кластера N- и K-Ras по сравнению с H-Ras.Ингибиторы Raf управляют образованием стабильных гетеро (BRaf-CRaf) и гомо (CRaf-CRaf) димеров. Таким образом, два Ras-связывающих домена в гомо- или гетеро-димере Raf необходимы для увеличения нанокластеризации K- и N-Ras, что предполагает, что димеры Raf способствуют образованию нанокластеров, выступая в качестве поперечных связей для Ras. GTP (комплекс Ras с GTP, активное состояние Ras) белков [117]. Сшивки увеличивают долю K-Ras и N-Ras в их соответствующих нанокластерах и усиливают кооперативность между соединенными мономерами Ras.Оба эффекта могут привести к усилению передачи сигналов MAPK. Кроме того, существует перекрестная связь между митогенными путями Ras / MAPK и выживанием PI3K / Akt. Повышенная передача сигналов MAPK в BRaf-ингибированных клетках снижает активацию Akt. Это также может быть по крайней мере частично понято с точки зрения нанокластеров: перекрестные помехи пути MAPK / Akt отражают конкуренцию между стабилизированными димерами Raf и p110α (каталитическая субъединица PI3K) за рекрутирование в нанокластеры Ras. Как мы рассмотрим ниже, тот факт, что нанокластеризация H-Ras не усиливается с помощью BRaf, можно объяснить его преимущественным расположением в доменах, обогащенных холестерином.

С нашей концептуальной точки зрения кластеры Ras также можно рассматривать как содержащие их нисходящие ассоциированные молекулы, такие как Raf (и др. Партнеры Ras, такие как PI3K). Это согласуется с нашей предпосылкой, что клеточная передача сигналов должна рассматриваться не в первую очередь как последовательность контролируемых диффузией молекулярных столкновений, а вместо этого как взаимодействия, образующие кластеры. Кластеры фактора транскрипции Foxp3 также содержат нижестоящих партнеров, включая GATA-3, который способствует экспрессии Foxp3 [10], как и кластеры передачи сигналов других путей, как наблюдали эксперименты по совместной локализации [108, 116, 118, 119; 120].Усиленная нанокластеризация и активация Ras за счет стабилизации димеров Raf также подтверждают роль аллостерической связи между молекулами Ras. Сшитые молекулы Ras по существу функционируют как димеры, даже если они являются мономерными GTPазами. Это может совместно усилить аллостерическую активацию Raf с помощью Ras. Для GPCRs аллостеризм между гомо- или гетеромерами, будь то димеры или олигомеры более высокого порядка, представляет такой дополнительный топографический ландшафт [121]. Кроме того, такие эффекты могут открывать возможности для новых терапевтических подходов.Сшивание доменов липидных рафтов мультивалентными лигандами или антителами, как известно, стабилизирует временные нанодомены и активирует ассоциированные сигнальные комплексы [122, 123], дополнительно утверждая, что это может быть механизмом в белковых нанокластерах, либо между мономерами, как в случае Ras; или между комплексами более высокого порядка. В случае киназы Lck, которая фосфорилирует рецептор Т-клеточного антигена (TCR), флуоресцентная микроскопия сверхвысокого разрешения, основанная на количественном определении размеров кластеров при детектировании одной молекулы, ясно продемонстрировала, что конформационные состояния Lck регулируют их собственное кластеризацию с открытым конформация, вызывающая кластеризацию, и закрытая конформация, предотвращающая кластеризацию [124].

Lck прикреплен к плазматической мембране миристоилированными и пальмилоилированными N-концевыми остатками. Ras заякорен с помощью комбинаций фарнезила и пальмитоила. Пальмитоилирование [125] и, вероятно, другие липофильные ПТМ, такие как фарнезил и миристоил, могут действовать как пространственно организующие системы, эффективно противодействуя энтропийному перераспределению пальмитоилированных периферических мембранных белков, действуя для разделения прикрепленных белков на мембранные домены. Регулирование скорости оборота пальмитата внешними сигналами может происходить из-за изменений доступности тиоловых или тиоэфирных групп на белке-субстрате при конформационных изменениях белка.Мембранное закрепление липофильных посттрансляционных модификаций также нарушает конформацию белка, приводя к функциональным конформационным изменениям, как в случае белка Ras. Важно отметить, что в то же время липидное окружение также нарушается, и это нарушение может также влиять на соседние белковые молекулы. Кристаллическая структура GPCR идентифицировала три кластера воды в рецепторе, всего 57 упорядоченных молекул воды, два холестерина, которые стабилизируют конформацию, и 23 упорядоченных липида, один из которых интеркалирует внутри карманов связывания лиганда [126].Было показано, что аллостерия в GPCR частично контролируется ионами (такими как натрий), компонентами мембраны (такими как липиды и холестерин), а также молекулами воды. Возможную роль холестерина, опосредующего передачу сигналов, также можно увидеть из ингибирования BRaf: как мы отметили выше, в то время как ингибирование BRaf усиливает кластеризацию K-Ras и N-Ras, нет никакого эффекта на H-Ras, который преимущественно находится в холестерин-обогащенных заказанные домены. В упорядоченных мембранных доменах уже может иметь место передача сигналов Ras, опосредованная холестерином, что устраняет эффект поперечных связей Raf.В целом, нанокластеры Ras иллюстрируют наш взгляд на передачу сигналов в клетках как на взаимодействия переформирования аллостерических кластеров, а не как на контролируемые диффузией молекулярные столкновения, подчеркивая роль популяционных сдвигов в конформационных ансамблях, прямо или опосредованных липидами.

Пространственная организация трансмембранных рецепторов в латеральных гомотипических, гетеротипических цис -взаимодействиях и межклеточных транс-взаимодействиях важна для кластеризации рецепторов и ассоциации с сигнальными белками.Липидные микродомены могут изменять активность трансмембранных рецепторов, влияя (положительно или отрицательно) на кластеры. Кластеризация трансмембранных рецепторов и липид-белковые взаимодействия важны для пространственной организации передачи сигналов на мембране [127]. Среди примеров кластеризации гомотипических рецепторов в цис являются RTK, межклеточные рецепторы Eph (Ephs) и их лиганды, эфрины. Клеточная пролиферация, дифференциация, миграция и адгезия являются критическими процессами в развитии.Оркестровка передачи сигнала осуществляется двумя семействами закрепленных на мембране белков-концентраторов: рецепторными тирозинкиназами Eph и их эфриновыми лигандами [128]. Предварительно сгруппированные эфрины образуют гомоолигомеры; при контакте клетки с клеткой они связывают Ephs со стехиометрией 1: 1. Кластеризация продолжается образованием тетрамеров, вызывая конформационные изменения как рецептора, так и лиганда. Домены тирозинкиназы Eph трансфосфорилируют друг друга, что инициирует передачу сигналов; однако рекрутирование киназ семейства Src (SFK) на лиганды ephrinA / B и фосфорилирование ephrinBs ведет к обратной передаче сигналов.Тетрамеры могут быть далее сгруппированы в сборки более высокого порядка, которые регулируют режим и силу передачи сигналов. Также могут иметь место различные способы кластеризации, например, через внеклеточные [129, 130] или цитоплазматические [131, 132] домены. Концентрация является ключевым фактором: при низкой концентрации рецептора предварительно кластеризованные лиганды эфрина необходимы для кластеризации Eph. Выше порога свободные EphAs могут образовывать кластеры независимо от связывания их с эфриновым лигандом. Высокоаффинные сборки Eph / ephrin, которые формируются на сайтах межклеточного контакта и необходимы для инициации передачи сигналов Eph [133].В киназе Tyr рецептора 2 рецептора эфрина типа A кластеризация и пространственное перемещение кластеров в микрометровом масштабе может приводить к ощущению механической силы [134].

Другой пример представлен интегрином, семейством α / β гетеродимерных рецепторов клеточной поверхности и основным медиатором прикрепления клеток к внеклеточному матриксу, члены которого способны передавать сигналы через мембрану в обоих направлениях. Интегрины часто встречаются в виде высокоорганизованных кластеров на поверхности клетки [135].Здесь также не всегда необходимы прямые белок-белковые взаимодействия, и передача сигналов может происходить через липидные молекулы, как в случае холестерина, опосредующего активацию рецептора, сопряженного с G-белком (GPCR), описанного выше [126] и H-Ras. Структуры пространственной организации в большом масштабе также могут быть результатом накопления множества более мелких кластеров от десятков до сотен молекул, как в случае Т-клеточных рецепторов (TCR) [9]. Такие кластеры наблюдались в иммунологическом синапсе также для других молекул, включая LAT [136], протеинкиназу, связанную с ζ-цепью (ZAP70) [137], домен Sh3, содержащий лейкоцитарный белок 76 кДа [138], CD28 [139] и CD2. [140].

Структурированная, но динамичная эукариотическая клетка

Эукариотические клетки высокоорганизованы с сетью покрытых мембраной органелл. Дополнительный уровень структурной организации обеспечивается цитоскелетом, который поддерживает форму клетки; закрепляет органеллы на месте; помогает в поглощении внешних материалов и в отделении дочерних клеток после деления клеток. Это также помогает в движущихся частях клетки в процессах роста и подвижности. Цитоскелет эукариот состоит из микрофиламентов, промежуточных нитей и микротрубок.Микрофиламенты представляют собой линейные полимеры субъединиц актина, которые создают силу за счет удлинения на одном конце волокна и усадки на другом. Они действуют как дорожки для движения миозина, который прикрепляется к микрофиламенту. Промежуточные волокна более стабильны и неоднородны. Подобно актиновым филаментам, они сохраняют форму клетки, неся напряжение. Промежуточные филаменты организуют внутреннюю структуру клетки, закрепляя органеллы и выступая в качестве структурных компонентов пластинки ядра.Микропробирки состоят из полимеров α- и β-тубулина. С ними связано большое количество белков, контролирующих клеточную структуру. Цитоскелет обеспечивает клеточный скелет цитоплазмы. Было предложено повысить уровень макромолекулярного краудинга за счет исключения макромолекул в цитозоле [141]. Белки цитоскелета взаимодействуют с клеточными мембранами [142] и вместе с мембранами органелл, эндоплазматическим ретикулумом и дополнительными каркасными белками, помогают в дальнейшей организации цитоплазмы и органелл, чтобы сегрегировать и совместно локализовать функциональные единицы, которые могут быть рассматриваются как автономные функциональные блоки, которые включают, выключают и передают сигналы.

Цитоскелет динамичен [143], и GTPases семейства Rho являются его главными регуляторами. Помимо регуляции организации актиновых филаментов с помощью Rho GTPases, RhoD играет роль в организации динамики актина. RhoD связывает фактор, способствующий нуклеации актина WHAMM, который связывает комплекс Arp2 / 3, и родственный филамин-A-связывающий белок FILIP1. WHAMM действует ниже RhoD и регулирует динамику цитоскелета. Основные эффекты на динамику цитоскелета указывают на то, что RhoD и его эффекторы контролируют жизненно важные клеточные процессы, управляемые цитоскелетом.RhoD координирует Arp2 / 3-зависимые и FLNa-зависимые механизмы, чтобы контролировать систему актиновых филаментов, клеточную адгезию и миграцию клеток [144]. Динамика клеточной поверхности зависит от оркестровки цитоскелета и плазматической мембраны с помощью Rho GTPases [145]. Факторы обмена нуклеотидов и белки, активирующие GTPase, регулируют активность Rho GTPases. В свою очередь, аппарат клеточного цикла регулирует экспрессию белков в путях передачи сигналов Rho посредством активации транскрипции, убиквитилирования и протеасомной деградации и модулирует их активность посредством фосфорилирования митотическими киназами [146].Этот регулируемый динамический ландшафт указывает на изменения в локальном составе цитозоля и исключенные объемы во времени и пространстве в разных масштабах длины. Это также свидетельствует о колебаниях уровня локального макромолекулярного скопления и подчеркивает нашу догадку о потенциале динамического цитоскелета в обеспечении передачи сигналов через клетку посредством аллостерических взаимодействий.

Цитоскелет, включая микротрубочки и сети актина, не просто обеспечивает структурную поддержку, выдерживает механическое напряжение, управляет подвижностью клеток и формирует дорожки; они являются активными регуляторами клеточного цикла, развития и судьбы [147–149].Белки, определяющие судьбу клеток и белки контрольных точек, обладают высоким сродством к микротрубочкам, и микротрубочка-зависимая организация немембранных компонентов управляет клеточной функцией [150]. Из-за плотности сети микротрубочек изолированные молекулы могут образовывать отдельные модульные среды [149]. Степень секвестрации зависит от аффинности связывания и плотности сети микротрубочек. Связывание, опосредованное моторными белками, которое приводит к конвективным потокам, дополнительно помогает в организации пространственной локализации молекул против градиента концентрации.Эффективность опосредованной микротрубочками секвестрации и пространственной организации можно наблюдать у синцитиального эмбриона Drosophila. Там белки зародышевой плазмы перемещаются из задней части коры эмбриона на митотические веретена, концентрируясь на полюсах веретена, посредством процесса транспортировки почти без утечек через 5 ~ 10 мм [151]. Во время этого долгого путешествия к полюсу они почти наверняка выпадают из микротрубочек; но ожидается, что они снова свяжутся при плотном ограничении, иначе, учитывая градиент концентрации, они будут диффундировать в цитоплазму.Таким образом, плотность сети микротрубочек должна быть достаточно высокой, чтобы вызывать смещенную концентрацию динеинов и их грузов на одном полюсе [152]. Этот пример может предоставить возможный механизм асимметричного распределения детерминант клеточной судьбы во время асимметричного клеточного деления и образования различных модульно-подобных сред. При умеренной плотности микротрубочек наблюдаются только частичная секвестрация и замедленная диффузия [153]. Таким образом, динамическое изменение архитектуры сети микротрубочек может достигать различных паттернов пространственной секвестрации и пространственной локализации клеточных компонентов.Подобная органелле сеть микротрубочек разделяет цитоплазму, ограничивает случайную диффузию, облегчает направленную транспортировку и, таким образом, может производить дифференциальное пространственное распределение клеточных компонентов [149]. Это также приводит к изменениям в морфологии и плотности сети. Эти скоординированные действия могут иметь место, поскольку тубулин, актин и динеин являются высокодинамичными аллостерическими белками [154–158].

Микротрубочки также являются высокодинамичными структурами, и, поскольку они вносят вклад в большинство клеточных функций, их необходимо регулировать в ответ на внеклеточные и внутриклеточные сигналы; однако связь между разнообразными сигнальными путями и регуляцией динамики микротрубочек все еще остается неясной.Модификации димера тубулина, ферментов, модифицирующих тубулин, и белков, связанных с микротрубочками, все непосредственно участвуют в регуляции поведения и функций микротрубочек [159]. Микротрубочки претерпевают широкий спектр посттрансляционных модификаций, включая полиглутамилирование, полиглицилирование, карбоксиконцевое расщепление и ацетилирование, функции которых до сих пор не совсем ясны. Среди них конститутивные и индуцибельные изоформы Hsp90 связываются с микротрубочками способом, который зависит от уровня ацетилирования тубулина.Ацетилирование тубулина также стимулирует связывание и сигнальную функцию по крайней мере двух из его клиентских белков, киназы Akt / PKB и фактора транскрипции p53 [160]. p21-активированная киназа 1 фосфорилирует кофактор тубулина B (который способствует димеризации α- и β-тубулина) и играет важную роль в возобновлении роста микротрубочек [161].

Передача сигналов в клеточной мембране

Организация липидов в клеточной мембране играет жизненно важную роль в передаче сигналов. Липидные рафты — это мембранные домены, более упорядоченные, чем основная мембрана, и обогащенные холестерином и сфинголипидами.Мы предполагаем, что мембранные рафты также являются динамически предварительно организованными и опосредуют аллостерическую передачу сигналов. Хотя диффузия в мембранах является двумерной (а не трехмерной, как в цитоплазме), это уменьшение размерности не обеспечивает эффективной или надежной передачи сигналов. В мембране также передача сигналов клеток должна рассматриваться не в первую очередь как последовательность контролируемых диффузией молекулярных столкновений, а как последовательности аллостерических взаимодействий, реформирующих кластеры, которые оптимизируются в сегрегированных упорядоченных рафтах. При разупорядочении ему помогают сшивки, как мы видели в случаях N- и K-Ras.Холестерин может как управлять образованием упорядоченных доменов в плазматической мембране клеток, и мы обсуждали выше для H-Ras и GPCR, непосредственно опосредуют передачу сигналов клетки посредством аллостерического распространения [162]. Липидные рафты можно рассматривать как сигнальные платформы с переменным составом и организацией, адаптированной для определенных путей [163], которые инициируются на клеточной поверхности. Они участвуют в многочисленных сигнальных путях [164], регуляция которых адаптирована к этим рафтам. Состав и организация взаимосвязаны: мембранные домены, лишенные холестерина, отличаются по своей организации от упорядоченных, содержащих холестерин доменов.Пример нанокластеров Ras с различными паттернами регуляции N- и K-Ras по сравнению с H-Ras иллюстрирует этот момент: H-Ras преимущественно находится в упорядоченных доменах, обогащенных холестерином; N-Ras в основном локализуется на границе раздела между упорядоченными и неупорядоченными доменами и якорями K-Ras в неупорядоченных доменах. Эти предпочтительные местоположения отражают паттерны их липофильных якорей посттрансляционной модификации. Липидные рафты модулируют сигнальные молекулы, участвующие во многих путях.К ним относятся плейотропные киназы src [165], которые активируют сигнальный путь PI3K-Akt; рецептор эпидермального фактора роста (EGFR), который связан с кавеолинами и участвует в различных процессах, включая регуляцию клеточного цикла, эндоцитоз и каскад MAPK [166]. Они также относятся к пути Ras, описанному выше. Именно эта сегрегированная доменная организация сигнальных молекул привела к концепции сигнаносомы. Сигналом содержит взаимодействующие компоненты сигнальных путей (таких как EGFR), встроенные в липидные рафты.Это регулируется белками-каркасами, такими как кавеолины, посредством компартментализации и концентрации сигнальных молекул. Кроме того, в цитоплазме белки-каркасы аллостерически контролируют регуляцию мультиферментных комплексов [103]; аналогичную роль может играть каркас интегральных мембранных белков с дальнейшим участием липидных (сфинголипидов и холестерина) молекул. Хорошим примером является сигнаносома CD40, связанная с ростом клеток В-клеточных лимфом. Сигналосома CD40 закреплена на липидных рафтах.Нарушение регуляции приводит к конститутивной активации пути NF-kappaB [167]. Подобные сигнальные организации действуют в нейронных системах, таких как система, включающая рецептор эстрогена (ER), которая связана с нейрогенезом, дифференцировкой нейронов, синаптической пластичностью и нейрозащитой.

Связь между ER, рецептором инсулинового фактора роста (IGF-1R), Cav-1 и потенциалозависимым анионным каналом, VDAC, также находится в липидных рафтах. Формирование этого сигнального комплекса зависит от липидного рафта.При болезни Ажеймера белки, идентифицированные с помощью масс-спектрометрии, были сгруппированы в определенные сигнальные пути, что позволило оценить, какие пути передачи сигналов липидного рафта могут быть изменены, а не изменения в отдельных белках. Этот подход системной биологии показал, что в липидных рафтах мыши дикого типа имели более высокую активацию путей выживания, таких как PTEN и Wnt / β-catenin, тогда как мыши 3xTg демонстрировали активацию путей передачи сигналов p53 и JNK.

Пространственная организация плазматической мембраны (2D-компартмент) и цитоплазмы (3D-компартмент) различается.В мембране происходит горизонтальная трансляционная диффузия, а не диффузия в трехмерном пространстве цитозоля или в одномерном цитоскелете. Уменьшение размерности мембран (и нитей) лишь незначительно увеличивает вероятность продуктивных взаимодействий между отдельными молекулами. Используя организацию мембранных рафтов и конформационное поведение белков и липидов, можно заранее организовать передачу сигналов. Предварительная организация размещает липидные компоненты пространственно в предпочтительных участках по отношению к белкам, что видно непосредственно из рентгеновской кристаллической структуры GPCR.Как мы отмечали выше, кристаллическая структура указывает на 23 упорядоченных липида, один из которых интеркалирует внутри карманов связывания лиганда, и два холестерина, которые стабилизируют конформацию, а также присутствие упорядоченных молекул воды [126]. Однако даже в двухмерных мембранных компартментах, обогащенных холестерином, множественные копии белков могут взаимодействовать, как в гомо- или гетеромерах, димерах или олигомерах более высокого порядка GPCR [121], а также с механизмами, включающими другие сигнальные белки в кластере, такие как Raf, сшивающий Ras.

Некоторые экспериментальные методы, которые проверяют гипотезы, вытекающие из нашей концептуальной основы

Ниже мы предоставляем несколько возможных экспериментальных методов, которые использовались в предыдущих исследованиях и которые, вероятно, будут использоваться в будущих исследованиях, которые могут проверить гипотезы, которые вытекают из концептуальной основы, предложенной в этом обзоре. Мы особо выделяем относительно новые методы, такие как оптогенетическая кластеризация белков [168]. Этот метод обеспечивает быструю и обратимую олигомеризацию белка в ответ на синий свет и основан на криптохроме 2 Arabidopsis thaliana .Криптохром 2-опосредованная кластеризация белков может динамически модулировать сигнальный путь; и как таковой может предложить способ количественного исследования динамики передачи сигнала. В частности, актуальным для нашего предположения является его способность изучать роль олигомеризации как механизма передачи сигналов в клетках. Более того, здесь олигомеризация осуществляется за счет света. Оптогенетические системы способны к точному, динамическому контролю сигнальных путей посредством опосредованной светом гетеродимеризации и гомодимеризации белков.Свет — это аллостерический эффектор. Этот метод обеспечивает многообещающую систему кластеризации белков для нацеливания на фундаментально более высокий уровень передачи сигналов в клетке. Помимо белков и небольших олигомеров, он позволяет изучать передачу сигналов внутри и между кластерами. Здесь авторы демонстрируют его силу, фотоактивируя путь β-катенина и RhoA GTPase.

Дополнительные методы включают микроскопию сверхвысокого разрешения, которая позволяет охарактеризовать TCR-зависимые сигнальные кластеры [169]. Этот метод позволил изучить сигнальные микрокластеры на уровне отдельных молекул с разрешением примерно до 20 нм.Кроме того, это помогло охарактеризовать распределение по размеру сигнальных кластеров на плазматической мембране интактных клеток. Этот метод обнаружил динамические и функциональные наноструктуры внутри сигнальных кластеров, как и было предсказано нашей концептуальной предпосылкой. Фотоактивированная локализационная микроскопия (PALM) и микроскопия прямой стохастической оптической реконструкции (dSTORM) отслеживали распределения ансамбля Lck на молекулярном уровне и наблюдали, что они контролируются Lck открытыми / закрытыми конформационными состояниями [124].Флуоресцентная микроскопия сверхвысокого разрешения, основанная на обнаружении одиночных молекул, позволила количественно определить размеры кластеров. Недавние инновации в визуализации живых клеток в субмикрометровом масштабе и отслеживании объектов (частиц) также помогают наблюдать сигнальные комплексы и кластеры и исследовать их динамический характер [98]. Это позволяет более подробно рассмотреть организацию сигнальных молекул более высокого порядка в живых клетках. Методы флуоресцентной микроскопии подходят для изучения субмикрометровых сигнальных узлов.

Кроме того, белки, идентифицированные с помощью масс-спектрометрии, были сгруппированы в определенные сигнальные пути, что позволило оценить сигнальные пути липидных рафтов и то, как они могут быть изменены на болезнь Альцгеймера, а не на изменения отдельных белков [170].

Заключение: динамические взаимодействия и конформационное смещение в клетке

Здесь мы описали наш взгляд на пространственную структуру клеточных сигнальных систем. Сигналы распространяются через взаимодействия; главные из них — между белками.Признаки белок-белковых взаимодействий напоминают те, которые присутствуют в ядрах белков [171, 172]. Сеть взаимодействия белков охватывает клетку [173, 174]; одни ассоциации долговечны, другие имеют место в краткосрочных масштабах. Сеть организована, а взаимодействия кооперативны [175]. Аллостерические сигналы распространяются через них, проходя через отдельные молекулы, их ассоциации, кластеры и клетку. Кластеры, состоящие из сотен молекул и различных составов, заранее организованы и динамичны с прочным связыванием, возникающим при прохождении аллостерического сигнала.Их образованию могут способствовать другие молекулы, такие как липиды и холестерин [176], РНК или ДНК. Связывание лиганда или посттрансляционные модификации приводят к конформационным пертурбациям. Чтобы свести к минимуму локальное разочарование, происходит конформационная реорганизация. Последовательный сигнал распространяется, вызывает конформационные и (или) динамические изменения в удаленных сайтах связывания, что приводит к определенному выбранному распознаванию. Изменения специфичны для лиганда: разные лиганды вызывают разные конформационные изменения.Такой сценарий [103, 104, 177] может дать представление о скоординированном клеточном ответе.

Хотя здесь мы дифференцировали клеточные организации в соответствии с их масштабами, в действительности существует континуум пространственных организаций белков, от молекулярных комплексов до доменов и кластеров, до цитоскелета; от межклеточного интерфейса к мембране, к цитоплазме и органеллам. Такая многомасштабная организация на разных уровнях может обеспечивать обратную связь для регулирования конкретных белков и коллективной передачи сигналов клетки.Фундаментальная предпосылка системной биологии состоит в том, что системная динамика дает начало клеточной функции [178]. Все процессы в течение жизни клетки, включая рост, дифференциацию, деление и апоптоз, являются временными; и их можно понять только с точки зрения динамики; динамика внутри и между модулями дает ключ к скоординированному функциональному контролю. И в этих рамках координация регулируется механизмом конформационного смещения, то есть смещением популяции. Сдвиг населения является источником аллостерии; это средство, с помощью которого действие на поверхности одного белка может быть выражено другим, находящимся вдали [96].По мере прохождения сигнала посредством короткоживущих и долгоживущих молекулярных взаимодействий, опосредованных белками, липидами, РНК и ДНК, он может усиливаться или подавляться, в зависимости от других аллостерических событий на его долгом пути. И в рамках этой структуры эффективная координация использует динамические, связанные, предварительно организованные кластеры, охватывающие ячейку.

Благодарности

Я благодарю группу NCI, Хюнбум Джанг, Буйонг Ма, Чунг-Юнг Цай за многочисленные обсуждения на протяжении многих лет. Этот проект полностью или частично финансируется за счет федеральных средств Национального института рака, Национальных институтов здравоохранения по контракту номер HHSN261200800001E.Содержание этой публикации не обязательно отражает взгляды или политику Министерства здравоохранения и социальных служб, а упоминание торговых наименований, коммерческих продуктов или организаций не подразумевает одобрения со стороны правительства США. Это исследование было поддержано (частично) Программой внутренних исследований Национального института здоровья, Национального института рака, Центра исследований рака.

Ссылки

1. Яноси Л., Ли З., Хэнкок Дж. Ф., Горфе А. А.. Организация, динамика и сегрегация нанокластеров Ras в мембранных доменах.Proc Natl Acad Sci U S. A. 2012; 109: 8097–8102. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 2. Айзенберг С., Беккет А.Дж., Прайор И.А., Деккер Ф.Дж., Хедберг С., Вальдманн Х., Эрлих М., Хенис Ю.И. Кластеризация белков Raft изменяет мембранные взаимодействия N-Ras и паттерн активации. Mol Cell Biol. 2011; 31: 3938–3952. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 3. Дэвидсон С., Макферсон Н., Митчелл Дж. Ядерная организация транскрипции РНК-полимеразы II. Biochem Cell Biol. 2013; 91: 22–30. [PubMed] [Google Scholar] 4.Санфасон Х. Изучение роли интегральных вирусных мембранных белков в содействии сборке фабрик репликации неповирусов и комовирусов. Фронтальный завод им. 2012; 3: 313. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 5. Сазерленд H, Бикмор WA. Фабрики транскрипции: экспрессия генов в союзах? Nat Rev Genet. 2009. 10: 457–466. [PubMed] [Google Scholar] 6. Хо Й, Шевчук Б.М., Liebhaber SA, Cooke NE. Определенные конфигурации хроматина регулируют фазы инициации и поддержания экспрессии гена hGH.Mol Cell Biol. 2013; 33: 1723–1734. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 8. Лю Дж., Нусинов Р. Гибкие кулины в лигазах cullin-RING E3 аллостерически регулируют убиквитинирование. Liu J, Nussinov R.J Biol Chem. 2011; 286: 40934–40942. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 9. Манц Б.Н., Гровс Дж. Т.. пространственная организация и передача сигнала в межклеточном соединении. Nature Rev Mol Cell Biol. 2010. 11: 342–352. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 10. Рудра Д., де Роос П., Чаудри А., Нек Р. Э., Арви А., Самштейн Р. М., Лесли С., Шаффер С. А., Гудлетт Д. Р., Руденски А.Ю.Фактор транскрипции Foxp3 и его белковые партнеры образуют сложную регуляторную сеть. Nat Immunol. 2012; 13: 1010–1019. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 11. Ма Б., Нусинов Р. Усиление передачи сигналов через клеточную аллостерическую ретрансляцию и нарушение белков. Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 2009; 106: 6887–6888. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 12. Ценг С.Р., Калодимос К.Г. Белковая динамика и аллостерия: ЯМР-взгляд. Современное мнение в структурной биологии.2011: 62–67. [PubMed] [Google Scholar] 13. Журавлев П.И., Папоян Г.А. Функциональные ландшафты белков, динамика, аллостерия: извилистый путь к универсальной теоретической основе. Ежеквартальные обзоры биофизики. 2010. 43: 295–332. [PubMed] [Google Scholar] 14. Kenakin T, Miller LJ. Семь трансмембранных рецепторов как изменяющие форму белки: влияние аллостерической модуляции и функциональной селективности на открытие новых лекарств. Фармакологические обзоры. 2010; 62: 265–304. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 15.Кенакин Т.П. Аллостерия рецепторов 7TM: цифры для преобразования белков. Направления фармакологических наук. 2009. 30: 460–469. [PubMed] [Google Scholar] 16. дель Соль А., Цай К.Дж., Ма Б., Нусинов Р. Происхождение аллостерической функциональной модуляции: множественные ранее существовавшие пути. Состав. 2009; 17: 1042–1050. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 17. Зокки Г. Управление белками с помощью молекулярных источников. Ежегодный обзор биофизики. 2009. 38: 75–88. [PubMed] [Google Scholar] 18. Уитли MJ, Ли А.Л.Структуры для понимания дальнодействующей внутрибелковой коммуникации. Современная наука о белках и пептидах. 2009. 10: 116–127. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 19. Цай К.Дж., Дель Соль А., Нусинов Р. Аллостерия белков, передача сигналов и динамика: схема классификации аллостерических механизмов. Молекулярные биосистемы. 2009; 5: 207–216. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 20. Goodey NM, Benkovic SJ. Аллостерическая регуляция и катализ возникают по общему пути. Природа химическая биология.2008. 4: 474–482. [PubMed] [Google Scholar] 21. Liu J, Nussinov R. Гибкий линкер Rbx1 облегчает функцию cullin-RING лигазы до неддилирования и после денддилирования. Биофиз Дж. 2010; 99: 736–744. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 22. Link H, Kochanowski K, Sauer U. Систематическая идентификация взаимодействий аллостерических белков и метаболитов, которые контролируют активность ферментов in vivo. Nat Biotechnol. 2013; 31: 357–361. [PubMed] [Google Scholar] 23. Лю Дж., Нусинов Р. Молекулярная динамика показывает важную роль линкерных движений в функции лигаз cullin-RING E3.J Mol Biol. 2010; 396: 1508–1523. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 25. Pérez Y, Maffei M, Igea A, Amata I, Gairí M, Nebreda AR, Bernadó P, Pons M. Связывание липидов доменами Unique и Sh4 c-Src предполагает новый регуляторный механизм. Научный доклад 2013; 3: 1295. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 27. Ан Ю, Ча СК, Юн Дж, Чанг С., Росс Э.М., Хуанг К.Л. WNK1 способствует синтезу PIP 2 для координации фактора роста и передачи сигналов GPCR-Gq. Curr Biol. 2011; 21: 1979–1987. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 28.Sridharan GV, Hassoun S, Lee K. Идентификация модулей биохимической сети на основе кратчайших ретроактивных расстояний. PLoS Comput Biol. 2011; 7: e1002262. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 29. Коррада Д., Морра Г., Коломбо Г. Исследование аллостерии в молекулярном распознавании: выводы из компьютерного исследования множественных комплексов антитело-антиген. J. Phys Chem B. 2013; 117: 535–52. [PubMed] [Google Scholar] 30. Капитанио Н., Палезе Л.Л., Капитанио Г., Мартино П.Л., Рихтер О.М., Людвиг Б., Папа С. Аллостерические взаимодействия и пути проведения протонов в протонной перекачке аа (3) оксидаз: гем а как ключевой элемент связи.Biochim Biophys Acta. 2012; 1817: 558–566. [PubMed] [Google Scholar] 31. Pandini A, Fornili A, Fraternali F, Kleinjung J. Обнаружение передачи аллостерического сигнала с помощью теоретико-информационного анализа динамики белка. FASEB J. 2012; 26: 868–881. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 32. Гаспер П.М., Фуглестад Б., Комивес Е.А., Марквик П.Р., Маккаммон Дж. А.. Аллостерические сети в тромбине различают прокоагулянтную и антикоагулянтную активности. Proc Natl Acad Sci USA. 2012; 109: 21216–21222. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 33.Лонг Д., Брюшвайлер Р. Атомистическая кинетическая модель популяционного сдвига и аллостерии в биомолекулах. J Am Chem Soc. 2011; 133: 8999–9005. [PubMed] [Google Scholar] 34. Джозеф Т.Т., Осман Р. Конвергентная передача информации о несоответствии направляющих-мишеней РНКи через внутреннюю аллостерическую сеть Argonaute. PLoS Comput Biol. 2012; 8: e1002693. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 35. Lechtenberg BC, Freund SM, Huntington JA. Ансамблевый вид аллостерии тромбина. Biol Chem. 2012; 393: 889–898. [PubMed] [Google Scholar] 36.Герек З.Н., Озкан СБ. Изменение в аллостерической сети влияет на сродство связывания доменов PDZ: анализ посредством сканирования реакции на возмущение. PLoS Comput Biol. 2011; 7: e1002154. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 37. Laine E, Auclair C, Tchertanov L. Аллостерическая связь между нативной и мутантной тирозинкиназой рецептора KIT. PLoS Comput Biol. 2012; 8: e1002661. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 39. Шан Кью, Хан Л., Линч Дж. У. Функция глициновых рецепторов α1R271Q / L, вызывающих гиперэкплексию, восстанавливается за счет смещения пораженного остатка из аллостерического сигнального пути.Br J Pharmacol. 2012; 165: 2113–2123. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 40. Leitner DM. Поток энергии в белках. Ежегодный обзор физической химии. 2008. 59: 233–259. [PubMed] [Google Scholar] 41. Фуксрайтер М., Саймон И., Бондос С. Динамическое распознавание ДНК-белка: за гранью того, что можно увидеть. Направления биохимических наук. 2011; 36: 415–423. [PubMed] [Google Scholar] 43. Маклафлин Р. Н., младший, Поелвейк Ф. Дж., Раман А., Госал В. С., Ранганатан Р. Пространственная архитектура функции белка и адаптации. Природа.2012; 491: 138–142. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 44. Виллемс Л., Тамбурини Дж., Чапюи Н., Лакомб С., Майё П., Бускари Д. Пути передачи сигналов PI3K и mTOR при раке: новые данные о таргетных методах лечения. Curr Oncol Rep. 2012; 14: 129–138. [PubMed] [Google Scholar] 45. Мурти Б.С., Ананд Г.С. Множественная аллостерия в регуляторах ответа: фосфорилирование и мутагенез активируют RegA альтернативными способами. J Mol Biol. 2012; 417: 468–487. [PubMed] [Google Scholar] 46. Ривальта I, Султан М.М., Ли Н.С., Мэнли Г.А., Лориа Дж. П., Батиста В.С.Аллостерические пути в имидазол-глицеринфосфатсинтазе. Proc Natl Acad Sci USA. 2012; 109: E1428–36. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 48. Andersen LM, Andreasen PA, Svendsen I, Keemink J, Østergaard H, Persson E. Антитело-индуцированное усиление активности фактора VIIa через различные аллостерические пути. J Biol Chem. 2012; 287: 8994–9001. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 49. Samways DS, Khakh BS, Egan TM. Аллостерическая модуляция потока Ca2 + в лиганд-зависимом катионном канале (P2X4) воздействием на боковые порталы.J Biol Chem. 2012; 287: 7594–7602. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 50. Endres NF, Engel K, Das R, Kovacs E, Kuriyan J. Регулирование каталитической активности рецептора EGF. Современное мнение в структурной биологии. 2011; 21: 777–784. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 51. Нусинов Р. Аллостерические модуляторы могут восстанавливать функцию рецептора аминокислотного нейромедиатора, слегка изменяя пути внутримолекулярной коммуникации. Британский журнал фармакологии. 2012; 165: 2110–2102.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 52. Ота Н, Агард Д.А. Внутримолекулярные пути передачи сигналов выявлены путем моделирования анизотропной термодиффузии. Журнал молекулярной биологии. 2005; 351: 345–354. [PubMed] [Google Scholar] 53. Pandini A, Fornili A, Fraternali F, Kleinjung J. Обнаружение передачи аллостерического сигнала с помощью теоретико-информационного анализа динамики белка. Журнал FASEB. 2012; 26: 868–881. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 54. Лонг Д., Брушвайлер Р. Атомистическая кинетическая модель популяционного сдвига и аллостерии в биомолекулах.Журнал Американского химического общества. 2011; 133: 18999–19005. [PubMed] [Google Scholar] 55. Диксит А, Верхивкер ГМ. Компьютерное моделирование аллостерической коммуникации раскрывает принципы организации передачи сигналов, индуцированной мутациями, в киназах ABL и EGFR. Вычислительная биология PLoS. 2011; 7: e1002179. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 56. Цай К.Дж., Нусинов Р. Активация ген-специфической транскрипции через дальнодействующее аллостерическое изменение формы. Биохимический журнал. 2011; 439: 15–25. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 57.Селваратнам Р., Чоудхури С., Ван Шоувен Б., Мелачини Г. Отображение аллостерии с помощью ковариационного анализа химических сдвигов ЯМР. Труды Национальной академии наук США. 2011; 108: 6133–6138. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 58. Лю Дж., Нусинов Р. Механизм убиквитинирования в аппарате лигазы cullin-RING E3: конформационный контроль ориентации субстрата. PLoS Comput Biol. 2009; 5: e1000527. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 59. Чжан Дж., Сапиенца П.Дж., Ке Х., Чанг А., Хенгель С.Р., Ван Х., Филлипс Г.Н., Ли А.Л.Кристаллографическая и ядерно-магнитно-резонансная оценка влияния связывания пептида со вторым PDZ-доменом протеинтирозинфосфатазы 1E. Биохимия. 2010; 49: 9280–9291. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 60. Chennubhotla C, Yang Z, Bahar I. Связь между глобальной динамикой и путями передачи сигнала: механизм аллостерии для шаперонина GroEL. Молекулярные биосистемы. 2008. 4: 287–292. [PubMed] [Google Scholar] 61. Marcos E, Crehuet R, Bahar I. Изменения в динамике при олигомеризации регулируют связывание субстрата и аллостерию в членах семейства аминокислотных киназ.Вычислительная биология PLoS. 2011; 7 (9): e1002201. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 62. Piwonski HM, Goomanovsky M, Bensimon D, Horovitz A, Haran G. Аллостерическое ингибирование отдельных молекул ферментов, захваченных липидными пузырьками. Труды Национальной академии наук США. 2012; 109: E1437–1443. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 63. Франк Г.А., Кипнис Ю., Смоленский Э., Даубе С.С., Хоровиц А., Харан Г. Дизайн оптического переключателя для изучения конформационной динамики в отдельных молекулах GroEL.Биоконъюгатная химия. 2008; 19: 1339–1341. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 64. Чен Дж, Дима Р.И., Тирумалай Д. Аллостерическая связь в дигидрофолатредуктазе: сигнальная сеть и пути для перехода от закрытого к закрытому и обратно. Журнал молекулярной биологии. 2007. 374: 250–266. [PubMed] [Google Scholar] 65. Ян X, Уэлч JL, Арнольд JJ, Boehr DD. Сети дальнодействующих взаимодействий в функции и точности РНК-зависимой РНК-полимеразы полиовируса изучаются методом ядерного магнитного резонанса.Биохимия. 2010; 49: 9361–9371. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 66. Pan Y, Tsai CJ, Ma B, Nussinov R. Как факторы транскрипции выбирают специфические сайты связывания в геноме? Nat Struct Mol Biol. 2009; 16: 1118–1120. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 68. Ма Б., Цай К.Дж., Пан Ю., Нусинов Р. Почему связывание белков с ДНК или белков с белками не обязательно означает функцию? ACS Chem Biol. 2010. 5: 265–272. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 69. Ривера В.М., Берк Л., Клэксон Т.Димеризатор-опосредованная регуляция экспрессии генов. Протоколы Колд-Спринг-Харбор. 2012; 2012: 767–770. [PubMed] [Google Scholar] 70. Коркмаз Е.Н., Нусинов Р., Халилоглу Т. Конформационный контроль связывания домена трансактивации белка MLL и c-Myb с доменом KIX CREB. Вычислительная биология PLoS. 2012; 8: e1002420. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 71. Клекнер И.Р., Голлник П., Фостер депутат. Механизмы регуляции аллостерических генов с помощью ЯМР количественной оценки микросекунд-миллисекундной динамики белка.Журнал молекулярной биологии. 2012; 415: 372–381. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 72. Битер А.Б., Ли С., Сун Н, Цай FT. Структурная основа межсубъединичной передачи сигналов в машине для дезагрегации белков. Труды Национальной академии наук США. 2012; 109: 12515–12520. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 73. Лесне А, Бечавин С, Виктор Ж. Конденсированное волокно хроматина: аллостерическая химико-механическая машина для передачи сигналов и обработки генома. Физическая биология. 2012; 9: 013001.[PubMed] [Google Scholar] 74. Cookson NA, Mather WH, Danino T, Mondragon-Palomino O, Williams RJ, Tsimring LS, Hasty J. Очередь для ферментативного процессинга: коррелированная передача сигналов через сопряженную деградацию. Молекулярная системная биология. 2011; 7: 561. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 75. О’Нил Л.А., Боуи АГ. Рабочий ход и распределительный вал устройства для обнаружения антивирусной РНК RIG-I. Клетка. 2011; 147: 259–61. [PubMed] [Google Scholar] 78. Meijsing SH, Pufall MA, So AY, Bates DL, Chen L, Yamamoto KR.Последовательность сайта связывания ДНК определяет структуру и активность рецептора глюкокортикоидов. Наука. 2009. 324: 407–410. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 79. Gronemeyer H, Bourguet W. Аллостерические эффекты определяют действие ядерных рецепторов: ДНК выступает в роли игрока. Сигнализация науки. 2009; 2: pe34. [PubMed] [Google Scholar] 80. Гантке Т., Шрискантхараджа С., Садовски М., Лей С.К. Регуляция киназой IκB пути TPL-2 / ERK MAPK. Иммунологические обзоры. 2012; 246: 168–82. [PubMed] [Google Scholar] 81. Робертс PJ, Der CJ.Нацеленность на каскад митоген-активируемой протеинкиназы Raf-MEK-ERK для лечения рака. Онкоген. 2007. 26: 3291–3310. [PubMed] [Google Scholar] 82. Гита Н., Михали Дж., Штокенхубер А., Блази Ф., Урин П., Биндер Б. Р., Фрайссмут М., Брейс Дж. М.. Интеграция сигналов и обнаружение совпадений в каскаде митоген-активируемой протеинкиназы / внеклеточной сигнально-регулируемой киназы (ERK): одновременная активация рецепторных тирозинкиназ и LRP-1 приводит к устойчивому фосфорилированию ERK за счет подавления фосфатаз двойной специфичности (DUSP1 и -6) Журнал биологической химии.2011. 286: 25663–25674. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] Отказано83. Шауль Ю.Д., Гибор Г., Плотников А., Сегер Р. Специфическое фосфорилирование и активация ERK1c с помощью MEK1b: уникальный путь в каскаде ERK. Гены и развитие. 2009; 23: 1779–1790. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 84. Самарасингхе РА, Витчелл С.Ф., Дефранко ДБ. Кооперативность и комплементарность: синергизм в неклассической и классической передаче сигналов глюкокортикоидов. Клеточный цикл. 2012; 11: 2819–2827. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 85.Цай CJ, дель Соль А., Нусинов Р. Аллостерия: отсутствие изменения формы не означает, что аллостерия не играет роли. Журнал молекулярной биологии. 2008; 378: 1–11. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 86. Фрауэнфельдер Х., Слигар С.Г., Волинс П.Г. Энергетические ландшафты и движения белков. Наука. 1991; 2541: 598–603. [PubMed] [Google Scholar] 87. Дилл К.А., Чан Х.С. От Левинталя к тропам и воронкам. Структурная биология природы. 1997; 4: 10–9. [PubMed] [Google Scholar] 88. Чан Х.С., Дилл К.А. Сворачивание белков в пейзажной перспективе: графики шевронов и неаррениусовская кинетика.Белки. 1998. 30: 2–33. [PubMed] [Google Scholar] 89. Цай С.Дж., Кумар С., Ма Б., Нусинов Р. Складывающиеся и связывающие каскады: динамические ландшафты и миграции населения. Белковая наука. 1999; 8: 1181–1890. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 90. Цай CJ, Ма Б., Нусинов Р. Складывающиеся и связывающие каскады: сдвиги в энергетических ландшафтах. Труды Национальной академии наук США. 1999; 96: 9970–9972. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 91. Кумар С., Ма Б., Цай С.Дж., Синха Н., Нусинов Р.Складывающиеся и связывающие каскады: динамические ландшафты и перемещение населения. Белковая наука. 2000; 91: 10–9. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 92. Цай К.Дж., Ма Б., Шам Й.Й., Кумар С., Нусинов Р. Структурный беспорядок и конформационный отбор. Белки. 2001; 44: 418–427. [PubMed] [Google Scholar] 93. Ма Б., Шацкий М., Вольфсон Х. Дж., Нусинов Р. Связывание множества различных лигандов в одном сайте белка: вопрос уже существующих популяций. Белковая наука. 2002; 11: 184–197. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 94.Gunasekaran K, Ma B, Nussinov R. Является ли аллостерия внутренним свойством всех динамических белков? Белки. 2004. 57: 433–443. [PubMed] [Google Scholar] 95. Ма Б., Кумар С., Цай С.Дж., Нусинов Р. Складные воронки и механизмы связывания. Белковая инженерия. 1999; 12: 713–720. [PubMed] [Google Scholar] 96. Кар Г., Кескин О., Гурсой А., Нусинов Р. Аллостерия и изменение населения в открытии лекарств. Современное мнение в фармакологии. 2010; 10: 715–722. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 97. Чермели П., Палотаи Р., Нусинов Р.Индуцированная подгонка, конформационный отбор и независимые динамические сегменты: расширенный обзор событий связывания. Направления биохимических наук. 2010; 35: 539–546. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 98. Cebecauer M, Spitaler M, Sergé A, Magee AI. Сигнальные комплексы и кластеры: функциональные преимущества и методические трудности. J Cell Sci. 2010; 123: 309–320. [PubMed] [Google Scholar] 99. Чжоу Х. Х., Ривас Г., Минтон А. П.. Макромолекулярное скопление и ограничение: биохимические, биофизические и потенциальные физиологические последствия.Анну Рев Биофиз. 2008. 37: 375–397. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 100. Окуда С., Ямада Т., Хамадзима М., Ито М., Катаяма Т., Борк П., Гото С., Канехиса М. Картографирование атласа KEGG для глобального анализа метаболических путей. Исследование нуклеиновых кислот. 2008; 36: W423–426. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 101. Tsai CJ, Ma B, Nussinov R. Сети белок-белковых взаимодействий: как может хаб-белок связывать так много разных партнеров? Направления биохимических наук. 2009. 34: 594–600. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 102.Нусинов Р., Цай С.Дж., Синь Ф., Радивояк П. Аллостерические посттрансляционные коды модификации. Trends Biochem Sci. 2012; 37: 447–455. [PubMed] [Google Scholar] 103. Нусинов Р., Ма Б., Цай С.Дж. Широкий взгляд на скаффолдинг предполагает, что скаффолдинговые белки могут активно контролировать регуляцию и передачу сигналов мультиферментных комплексов через аллостерию. Biochim Biophys Acta. 2013; 1834: 820–829. [PubMed] [Google Scholar] 104. Нусинов Р., Цай С.Дж., Ма Б. Недооцененная роль аллостерии в сотовой сети.Ежегодный обзор биофизики. 2013; 42: 169–189. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 105. Башор CJ, Helman NC, Yan S, Lim WA. Использование инженерных взаимодействий каркаса для изменения динамики передачи сигналов пути киназы MAP. Наука 2012. 2008; 319: 1539–1543. [PubMed] [Google Scholar] 106. Залатан Дж. Г., Койл С. М., Раджан С., Сидху С. С., Лим ВА. Конформационный контроль белка каркаса Ste5 изолирует против неправильной активации киназы MAP. Наука. 2012; 337: 1218–1222. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 107.Уоррен С.М., Ландграф Р. Передача сигналов через рецепторы ERBB: несколько уровней разнообразия и контроля. Сотовый сигнал. 2006; 18: 923–933. [PubMed] [Google Scholar] 108. Тиан Т., Хардинг А., Индер К., Пахарь С., Партон Р. Г., Хэнкок Дж. Ф. Плазменные мембранные нанопереключатели генерируют высокоточное преобразование Rassignal. Nature Cell Biol. 2007; 9: 905–914. [PubMed] [Google Scholar] 109. Приор И. А., Мунке С., Партон Р. Г., Хэнкок Дж. Ф. Прямая визуализация белков Ras в пространственно различных микродоменах клеточной поверхности. J Cell Biol.2003. 160: 165–170. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 111. Депоил Д., Флэр С., Треанор Б. Л., Вебер М., Харвуд Н. Э., Марчбанк К. Л., Тибулевич В. Л., Батиста Ф. Д.. CD19 необходим для активации В-клеток, способствуя формированию микрокластеров рецептор-антиген В-клеток в ответ на мембраносвязанный лиганд. Nat Immunol. 2008; 9: 63–72. [PubMed] [Google Scholar] 112. Варма Р., Кампи Дж., Йокосука Т., Сайто Т., Дастин М.Л. Проксимальные сигналы Т-клеточного рецептора поддерживаются в периферических микрокластерах и заканчиваются в центральном супрамолекулярном активационном кластере.Иммунитет. 2006. 25: 117–127. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 113. Cebecauer M, Spitaler M, Sergé A, Magee AI. Сигнальные комплексы и кластеры: функциональные преимущества и методические трудности. J Cell Sci. 2010; 123: 309–20. [PubMed] [Google Scholar] 114. Ли З., Яноши Л., Горфе А.А. Формирование и разделение домена нанокластеров пептидов H-ras: влияние концентрации пептидов и липидного состава. J Am Chem Soc. 2012; 134: 17278–17285. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 116. Хибино К., Ватанабэ Т.М., Кодзука Дж., Иване А.Х., Окада Т., Катаока Т., Янагида Т., Сако Ю.Одно- и многомолекулярная динамика передачи сигналов от H-Ras к cRaf-1, визуализированная на плазматической мембране живых клеток. Chemphyschem. 2003. 4: 748–753. [PubMed] [Google Scholar] 117. Cho KJ, Kasai RS, Park JH, Chigurupati S, Heidorn SJ, van der Hoeven D, Ploughman SJ, Kusumi A, Marais R, Hancock J. Raf ингибиторы нацелены на пространственно-временную динамику ras. Curr Biol. 2012; 22: 945–955. [PubMed] [Google Scholar] 118. Баннелл СК, Капур В., Трайбл Р.П., Чжан В., Самельсон Л.Е. Динамическая полимеризация актина запускает распространение, индуцированное рецептором Т-клеток: роль адаптера передачи сигнала LAT.Иммунитет. 2001; 14: 315–329. [PubMed] [Google Scholar] 119. Кампи Г., Варма Р., Дастин М.Л. Актин и микрокластеры рецепторов Т-лимфоцитов, зависимых от комплекса агонистов МНС и пептида, в качестве каркасов для передачи сигналов. J Exp Med. 2005; 202: 1031–1036. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 120. Yokosuka T, Sakata-Sogawa K, Kobayashi W, Hiroshima M, Hashimoto-Tane A, Tokunaga M, Dustin ML, Saito T. Новые микрокластеры рецепторов Т-клеток инициируют и поддерживают активацию Т-клеток за счет рекрутирования Zap70 и SLP-76. Nat Immunol.2005; 6: 1253–1262. [PubMed] [Google Scholar] 121. Смит Н.Дж., Миллиган Г. Аллостерия на гомо- и гетеромерах рецепторов, связанных с G-белком: неизведанные фармакологические пейзажи. Pharmacol Rev.2010; 62: 701–5. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 122. Suzuki KG, Fujiwara TK, Sanematsu F, Iino R, Edidin M, Kusumi A. GPI-заякоренные рецепторные кластеры временно привлекают Lyn и G-альфа для временной иммобилизации кластера и активации Lyn: исследование отслеживания одиночных молекул 1. J Cell Biol. 2007. 177: 717–730.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 123. Судзуки К.Г., Фудзивара Т.К., Эдидин М., Кусуми А. Динамическое привлечение гамма-фосфолипазы C на временно иммобилизованных GPI-заякоренных рецепторных кластерах индуцирует передачу сигналов IP3-Ca2 +: исследование отслеживания одиночных молекул 2. J Cell Biol. 2007; 177: 731–742. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 124. Росси Дж., Оуэн Д.М., Уильямсон Д.Д., Ян З., Гаус К. Конформационные состояния киназы Lck регулируют кластеризацию в ранней передаче сигналов Т-клеток. Nat Immunol. 2013; 14: 82–89.[PubMed] [Google Scholar] 125. Рокс О., Герауэр М., Вартак Н., Кох С., Хуанг З. П., Печливанис М., Кульман Дж., Брунсвельд Л., Чандра А., Эллингер Б., Вальдманн Н., Бастиаенс П. И.. Аппарат пальмитоилирования представляет собой систему пространственной организации периферических мембранных белков. Клетка. 2010. 141: 458–471. [PubMed] [Google Scholar] 126. Лю В., Чун Э, Томпсон А.А., Чубуков П., Сюй Ф., Катрич В., Хан Г.В., Рот CB, Хейтман Л.Х., Джерман А.П., Черезов В., Стивенс Р.С. Структурные основы аллостерической регуляции GPCR ионами натрия.Наука. 2012; 337: 232–236. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 127. Бетани И., Сканланд С.С., Дикич И., Акер-Палмер А. Пространственная организация передачи сигналов трансмембранного рецептора. EMBO J. 2010; 29: 2677–2688. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 129. Химанен Дж. П., Ермекбаева Л., Джейн П. У., Уокер Дж. Р., Сюй К., Атапатту Л., Раджашанкар К. Р., Менсинга А., Лакманн М., Николов Д. Б., Де-Паганон С. Архитектура кластеров рецепторов Eph. Proc Natl Acad Sci USA. 2010; 107: 10860–10865. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 130.Сейрадаке Е., Харлос К., Саттон Г., Ариску А.Р., Джонс Е.Ю. Механизм внеклеточного стерического посева для сборки платформы передачи сигналов эфрина. Nat Struct Mol Biol. 2010. 17: 398–402. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 131. Lackmann M, Oates AC, Dottori M, Smith FM, Do C, Power M, Kravets L, Boyd AW. Определенные субдомены рецептора EphA3 опосредуют связывание лиганда и димеризацию рецептора. J Biol Chem. 1998; 273: 20228–20237. [PubMed] [Google Scholar] 132. Wimmer-Kleikamp SH, Janes PW, Squire A, Bastiaens PIH, Lackmann M.Рекрутирование рецепторов Eph в сигнальные кластеры не требует контакта с эфрином. J Cell Biol. 2004. 164: 661–666. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 133. Николов Д.Б., Сюй К., Химанен Дж.П. Распознавание эфрина / эфрина и роль кластеров эфрина / эфрина в инициации передачи сигналов. Biochim Biophys Acta. 2013 DOI: 10.1016 / j.bbapap.2013.04.020. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 134. Salaita K, Nair PM, Petit RS, Neve RM, Das D, Gray JW, Groves JT. Ограничение движения рецептора изменяет клеточный ответ: восприятие физической силы EphA2.Наука. 2010. 327: 1380–1385. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 135. Арнаут М.А., Махалингам Б., Сюн Дж.П. Структура интегрина, аллостерия и двунаправленная передача сигналов. Annu Rev Cell Dev Biol. 2005; 21: 381–410. [PubMed] [Google Scholar] 136. Баннелл С.К., Хонг Д.И., Кардон-младший, Ямадзаки Т., МакГлэйд С.Дж., Барр В.А., Самельсон Л.Е. Лигирование рецепторов Т-клеток индуцирует образование динамически регулируемых сигнальных сборок. J Cell Biol. 2002; 158: 1263–1275. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 137. Gestwicki JE, Kiessling LL.Межрецепторная коммуникация через массивы бактериальных хеморецепторов. Природа. 2002; 415: 81–4. [PubMed] [Google Scholar] 138. Нгуен К., Сильвен Н.Р., Баннелл СК. Костимуляция Т-клеток посредством интегрина VLA-4 ингибирует актинзависимую централизацию сигнальных микрокластеров, содержащих адаптер SLP-76. Иммунитет. 2008. 28: 810–821. [PubMed] [Google Scholar] 139. Йокосука Т., Кобаяси В., Саката-Согава К., Такамацу М., Хашимото-Тане А., Дастин М.Л., Токунага М., Сайто Т. Пространственно-временная регуляция костимуляции Т-клеток микрокластерами TCR-CD28 и транслокацией протеинкиназы Cτ.Иммунитет. 2008; 29: 589–601. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 140. Kaizuka Y, Douglass AD, Vardhana S, Dustin ML, Vale RD. Корецептор CD2 использует микродомены плазматической мембраны для передачи сигналов в Т-клетки. J Cell Biol. 2009; 185: 521–534. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 142. Доэрти Г.Дж., МакМахон ХТ. Посредничество, модуляция и последствия взаимодействия мембрана-цитоскелет. Ежегодный обзор биофизики. 2008; 37: 65–95. [PubMed] [Google Scholar] 143. Хендрикс А.Г., Хольцбаур Э.Л., Гольдман Ю.Е.Измерения силы на грузах в живых клетках показывают коллективную динамику моторов микротрубочек. Proc Natl Acad Sci USA. 2012; 109: 18447–18452. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 144. Gad AK, Nehru V, Ruusala A, Aspenström P. RhoD регулирует динамику цитоскелета через фактор, способствующий нуклеации актина WHAMM. Mol Biol Cel. 2012; 23: 4807–4819. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 145. de Curtis I, Meldolesi J. Динамика клеточной поверхности — как Rho GTPases организуют взаимодействие между плазматической мембраной и кортикальным цитоскелетом.J Cell Sci. 2012; 125: 4435–4444. [PubMed] [Google Scholar] 146. Готье NC, Мастерс Т.А., Шитц МП. Механическая обратная связь между натяжением мембраны и динамикой. Trends Cell Biol. 2012; 22: 527–535. [PubMed] [Google Scholar] 148. Сент-Джонстон Д. Движущиеся сообщения: внутриклеточная локализация мРНК. Обзоры природы Молекулярная клеточная биология. 2005; 6: 363–375. [PubMed] [Google Scholar] 149. Чен Дж., Липпинкотт-Шварц Дж., Лю Дж. Внутриклеточная пространственная локализация регулируется сетью микротрубочек. PLoS One.2012; 7: e34919. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 150. Биркенфельд Дж., Налбант П., Юн Ш., Бокоч Г. М.. Клеточные функции GEF-h2, Rho-GEF, регулируемого микротрубочками: является ли измененная активность GEF-h2 решающим фактором патогенеза заболевания? Trends Cell Biol. 2008. 18: 210–219. [PubMed] [Google Scholar] 151. Лерит Д.А., Гэвис Э.Р. Транспорт зародышевой плазмы по астральным микротрубочкам направляет развитие зародышевых клеток у дрозофилы. Текущая биология. 2011; 21: 439–448. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 152.Лерит Д.А., Гэвис Э.Р. Транспорт зародышевой плазмы по астральным микротрубочкам направляет развитие зародышевых клеток у дрозофилы. Текущая биология. 2011; 21: 439–448. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 153. ДеЛотто Р., ДеЛотто Ю., Стюард Р., Липпинкотт-Шварц Дж. Ядерно-цитоплазматический челночный транспорт опосредует динамическое поддержание ядерных дорсальных уровней во время эмбриогенеза дрозофилы. Разработка. 2007. 134: 4233–4241. [PubMed] [Google Scholar] 154. Уйфалуси З., Ковач М., Надь Н.Т., Барко С., Хильд Дж., Лукач А., Нитрай М., Бугьи Б.Миозин и тропомиозин стабилизируют конформацию актиновых филаментов, образованных формином. J Biol Chem. 2012; 287: 31894–31904. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 155. Верле-Халлер Б. Сборка и разборка адгезий клеточного матрикса. Curr Opin Cell Biol. 2012; 24: 569–581. [PubMed] [Google Scholar] 156. Prochniewicz E, Pierre A, McCullough BR, Chin HF, Cao W, Saunders LP, Thomas DD, De La Cruz EM. Динамика актиновых филаментов в комплексе актомиозина VI регулируется аллостерически с помощью легкой цепи кальций-кальмодулин.J Mol Biol. 2011; 413: 584–592. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 157. Кокс CD, Гарбаччо RM. Открытие аллостерических ингибиторов кинезинового белка веретена (KSP) для лечения таксанорезистентного рака: MK-0731 и аналоги. Противораковые агенты Med Chem. 2010; 10: 697–712. [PubMed] [Google Scholar] 158. Сигер М.А., Райс С.Е. Связанное с микротрубочками протеиноподобное связывание хвоста кинезина-1 с микротрубочками. J Biol Chem. 2010. 285: 8155–62. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 159. Этьен-Манневиль С.От сигнальных путей до динамики микротрубочек: ключевые игроки. Curr Opin Cell Biol. 2010; 22: 104–11. [PubMed] [Google Scholar] 160. Giustiniani J, Daire V, Cantaloube I, Durand G, Poüs C, Perdiz D, Baillet A. Ацетилирование тубулина способствует привлечению Hsp90 к микротрубочкам и стимулирует сигнальную функцию Akt / PKB и p53 клиентов Hsp90. Сотовый сигнал. 2009; 21: 529–539. [PubMed] [Google Scholar] 161. Rayala SK, Martin E, Sharina IG, Molli PR, Wang X, Jacobson R, Murad F, Kumar R. Динамическое взаимодействие между нитрованием и фосфорилированием кофактора тубулина B в контроле динамики микротрубочек.Proc Natl Acad Sci USA. 2007; 104: 19470–19475. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 162. Оуэн Д.М., Магенау А., Уильямсон Д., Гаус К. Гипотеза липидного плотика пересмотрела новые взгляды на состав и функцию плотины, полученные с помощью флуоресцентной микроскопии сверхвысокого разрешения. Биологические исследования. 2012; 34: 739–47. [PubMed] [Google Scholar] 163. Хикс Д.А., Наливаева Н.Н., Тернер А.Дж. Липидные рафты и болезнь Альцгеймера: белок-липидные взаимодействия и нарушение передачи сигналов. Front Physiol. 2012; 3: 189. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 164.Аллен Дж. А., Халверсон-Тамболи Р. А., Расеник М. М.. Микродомены липидного рафта и передача сигналов нейромедиатора. Nat Rev Neurosci. 2007. 8: 128–140. [PubMed] [Google Scholar] 165. Аркаро А, Оберт М., Эспиноза дель Йерро, МЭ, Ханзада, Великобритания, Ангелиду С., Тетли Т.Д., Биттерманн АГ, Фрейм МС, Секл М.Дж. Критическая роль киназ Src, связанных с липидными рафтами, в активации передачи сигналов PI3K-Akt. Сотовый сигнал. 2007; 19: 1081–1092. [PubMed] [Google Scholar] 166. Ода К., Мацуока Ю., Фунахаши А., Китано Х. Комплексная карта путей передачи сигналов рецептора эпидермального фактора роста.Mol Syst Biol. 2005; 1: 2005.0010. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 167. Фам Л., Тамайо А.Т., Йошимура Л.К., Ло П, Терри Н., Рид П.С., Форд Р.Дж. Сигналосома CD40, закрепленная в липидных рафтах, приводит к конститутивной активации NF-kappaB и автономному росту клеток в B-клеточных лимфомах. Иммунитет. 2002; 16: 37–50. [PubMed] [Google Scholar] 168. Бугай Л.Дж., Чокси А.Т., Месуда СК, Кейн Р.С., Шаффер Д.В. Оптогенетическая кластеризация белков и активация передачи сигналов в клетках млекопитающих. Нат методы. 2013; 10: 249–252.[PubMed] [Google Scholar] 169. Шерман Э, Барр В., Самельсон Л. Э. Характеристика сверхвысокого разрешения TCR-зависимых сигнальных кластеров. Immunol Rev.2013; 251: 21–35. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 170. Хикс Д.А., Наливаева Н.Н., Тернер А.Дж. Липидные рафты и болезнь Альцгеймера: белок-липидные взаимодействия и нарушение передачи сигналов. FrontPhysiol. 2012; 3: 189. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 171. Цай С.Дж., Нусинов Р. Гидрофобные фолдинг-единицы на стыках белок-белок: влияние на фолдинг белка и ассоциацию белок-белок.Белковая наука. 1997; 6: 1426–1437. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 172. Tsai CJ, Lin SL, Wolfson HJ, Nussinov R. Интерфейсы белок-белок: Архитектура и взаимодействия в интерфейсах белок-белок и в ядрах белка. Их сходства и различия. Критические обзоры в биохимии и молекулярной биологии. 1996. 31: 127–152. [PubMed] [Google Scholar] 173. Киль С., Белтрао П., Серрано Л. Анализ сетей взаимодействия белков с использованием структурной информации. Анну Рев Биохим. 2008; 77: 415–441.[PubMed] [Google Scholar] 174. Моска Р., Сеол А., Алой П. Interactome3D: добавление структурных деталей в белковые сети. Нат методы. 2012; 10: 47–53. [PubMed] [Google Scholar] 175. Кескин О., Ма Б., Рогале К., Гунасекаран К., Нусинов Р. Взаимодействия белков и белков: организация, кооперативность и картирование в восходящем подходе системной биологии. Phys Biol. 2005; 2: S24–35. [PubMed] [Google Scholar] 176. Мольнар Э., Свами М., Хольцер М., Бек-Гарсия К., Ворч Р., Тиле С., Гигас Г., Бой К., Люшер И. Ф., Швилле П., Шуберт Р., Шамель В.Холестерин и сфингомиелин управляют нанокластеризацией рецепторов антигена Т-клеток, не зависящей от лиганда. J Biol Chem. 2012; 287: 42664–42674. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 177. Нусинов Р, Цай CJ. Аллостерия в болезни и в открытии лекарств. Клетка. 2013; 153: 293–305. [PubMed] [Google Scholar] 178. Волькенхауэр О., Месарович М. Динамика обратной связи и функции клеток: почему системная биология называется системной биологией. Мол Биосист. 2005; 1: 14–6. [PubMed] [Google Scholar]

The Proposal, Class 10 CBSE English Lesson Summary, Explanation

Автор Ручика Гупта

Краткое содержание предложения CBSE Class 10 English Книга первых полетов Глава 11 Объяснение, ответы на вопросы

The Proposal Class 10 English First Flight Lesson 11 — Подробное объяснение урока со значениями сложных слов.Кроме того, за объяснением следует Краткое изложение урока. Все упражнения и вопросы и ответы, приведенные в конце урока, были рассмотрены.

Class 10 English (First Flight) Глава 11 — Предложение

Антон Чеков

Введение в предложение

«Предложение» — одноактная пьеса, которая начинается с того, что молодой человек Ломов делает предложение руки и сердца дочери своего соседа.Прежде чем он смог действительно передать это девушке, они вступили в спор по поводу Вычьих лугов. Чубуков, отец дамы также присоединяется к бурному обсуждению. После этого они снова вступают в спор о своих собаках и о том, какая из них лучше другой. В разгар всего этого предложение забывается, пока Ломов не падает из-за его сердцебиения, и Чубуков моментально кладет руки ее дочери в руки Ломова. К сожалению, ссора продолжается.

The Proposal Class 10 Краткое содержание английской поэмы CBSE, объяснение — см. Видео

Вопросы MCQ предложения

Краткое содержание предложения

Занавес поднимается, и Ломов входит в дом своего соседа Чубукова, полностью одетый в свой вечерний наряд.Чубуков удивляется, увидев его хорошо одетым, и спрашивает его о поводе. Ломов сообщает, что пришел с просьбой. Чубуков предполагает, что он, должно быть, пришел попросить денег, которые не собирается отдавать. Узнав, что Ломов приехал просить дочь Чубулова, руки Натальи, Чубуков приходит в восторг и уезжает звонить Наталье. Ломов, 35-летний джентльмен, страдает учащенным сердцебиением, очень легко расстраивается и плохо спит. Он считает, что это лучший возраст для него, чтобы жениться, и рад, что он принял решение о Наталье.По его словам, Наталья среднего вида и хорошая хозяйка. Когда приезжает Наталья, Ломов начинает разговор о том, как он благодарен и рад, что их семьи с самого начала в хороших отношениях. Продолжая рассказывать о своей земле, он как-то упоминает о Бычьих лугах, которые раньше были спорной собственностью, а теперь принадлежат ему. Наталья не могла поверить ни единому его слову, потому что считает, что Воловьи луга принадлежат ее семье. Оба они вступают в бурную дискуссию и ведут себя по-детски, когда входит Чубуков, просто для того, чтобы разговор еще более накалился.Они кричат ​​и кричат, в то время как Ломов страдает от сильного сердцебиения, тяги в бок и онемения ступни. Выгоняют Ломова из дома и продолжают его проклинать. Плохо отзываясь о нем, Чубуков непреднамеренно показывает, что он пришел с предложением руки и сердца для Натальи, что удивляет Наталью, и она сразу же сожалеет об отправке его. Она велит отцу немедленно вернуть его, и Чубуков проклинает себя за то, что он отец взрослой дочери. Когда Ломов возвращается, Наталья пытается уйти в другую тему и начинает говорить о стрельбе.Как-то они вступают в спор с участием своих собак. Наталья считает, что ее Squeezer лучше, чем Guess Ломова. Они продолжают спорить, когда на сцену выходит Чубуков, только чтобы снова усугубить ситуацию. Все становятся гиперактивными, и Ломов наконец падает из-за учащенного сердцебиения. Даже тогда ругательства продолжаются, когда Наталья внезапно замечает, что он без сознания. Они пытаются влить ему воду в горло, но безуспешно и объявляют его мертвым. Только когда Ломов немного пошевелится, его кормили водой, а Чубуков с силой протягивает ему руки Натальи, благословляет и просит их поцеловать.Ломов, еще не полностью осознавший, не понимает, что происходит. Когда он наконец приходит в себя, он выражает свое волнение и целует руки Натальи. Наталья, будучи ребячливой, манипулирует им, чтобы он согласился с тем, что Squeezer лучше, чем Guess, но Ломов, будучи непреклонным, отказывается принять это. Таким образом, снова продолжаются ссоры.

Урок предложения и объяснение

«Предложение» (первоначально называвшееся «Предложение о браке») — одноактная пьеса-фарс русского новеллиста и драматурга Антона Чехова.Он был написан в 1888–1889 годах.
В пьесе рассказывается о тенденции богатых семей искать связи с другими богатыми семьями, увеличивать свое состояние, поощряя браки, которые имеют хороший экономический смысл. Иван Ломов, давний богатый сосед Степана Чубукова, тоже богатого, приходит за помощью к 25-летней дочери Чубукова, Наталье. Все трое сварливые люди и ссорятся из-за мелочей. Предложение рискует быть забытым среди всех этих споров.Но экономический здравый смысл в конце концов гарантирует, что предложение сделано — хотя споры, возможно, продолжаются!

Фарс: комедийно-драматическое произведение

Пьеса изначально называлась «Предложение руки и сердца», написанная русским писателем Антоном Чеховым. Он показывает, как богатые хотят выдать своих детей замуж за других богатых семей с целью увеличения своего богатства. Персонажи сварливы и часто ссорятся из-за пустяков. Тем не менее, они помнят предложение руки и сердца, которое принесет денежную выгоду и завершит свадьбу среди боевых действий.

Персонажи

СТЕПАН СТЕПАНОВИЧ ЧУБУКОВ: помещик
НАТАЛЬЯ СТЕПАНОВНА: его дочь, 25 лет
ИВАН ВАСИЛЬЕВИЧ ЛОМОВ: сосед Чубукова, крупный и душевный, но очень подозрительный помещик

Гостиная в доме Чубуковых. Входит Ломов в фраке и белых перчатках. Чубуков встает ему навстречу.

В гостиной Чубукова поднимается занавес, куда входит Ломов, полностью одетый в вечерний костюм.Чубуков встает, чтобы поприветствовать его.

ЧУБУКОВ: Милый мой, кого я вижу! Иван Василевич! Я безумно рада! [Сжимает его руку] Теперь это сюрприз, моя дорогая … Как ты?

Чубуков очень вежливо встречает своего соседа Ивана Васильевича и спрашивает о его благополучии. Обмениваясь рукопожатием, он также спрашивает Ломова о причине его визита.

ЛОМОВ: Спасибо. И как у вас дела?

Поблагодарив Чубукова за вопрос о его благополучии, Ломов спрашивает его о его состоянии.

ЧУБУКОВ: Мы просто как-то ладим, мой ангел, благодаря твоим молитвам и так далее. Сядь, пожалуйста … Ну, знаешь, не забывай все о своих соседях, моя дорогая. Дорогой мой, почему ты так формален в своем наряде! Вечернее платье, перчатки и тд. Ты можешь пойти куда-нибудь, мое сокровище?

Чубуков отвечает, что им каким-то образом удается мирно выжить с благословения таких людей, как сам Ломов. Он просит его сесть и поудобнее.Удивленный его формальным вечерним нарядом, он сомневается в случившемся. Чубуков очень вежливо разговаривает, поэтому он часто называет Ломова «моим ангелом», «моим сокровищем» и т. Д.

ЛОМОВ: Нет. Я приехал только к вам, уважаемый Степан Степанович.

Ломов отвечает, что особого случая нет и он только что приехал к почитаемому Степану Степановичу.

ЧУБУКОВ: Тогда почему ты в вечернем платье, моя прелесть? Как будто вы навещаете Новый год!

Все еще любопытно, Чубуков спрашивает его, почему наряд Ломова, потому что ему кажется, что Ломов навещает их в канун Нового года.

ЛОМОВ: Ну вот видишь, вот так. [Берет его под руку.] Я пришел к вам, уважаемый Степан Степанович, побеспокоить вас с просьбой. Не раз и не два я уже имел честь обращаться к вам за помощью, а вы всегда, так сказать … Прошу прощения, я в восторге. Я выпью воды, уважаемый Степан Степанович. [Напитки.]
Привилегия-преимущество

При всем уважении, Ломов хватает Чубукова за руку и сообщает о своем намерении побеспокоить его просьбой.Со всей благодарностью Ломов вспоминает случаи, когда ему помогал Чубуков, и, продолжая говорить, он начинает волноваться. Чтобы успокоиться, он пьет воду.

ЧУБУКОВ: [в сторону] Он пришел занять денег. Не дай ему! [вслух] Что такое, красотка моя?
Shan’t- не должен

Чубуков предполагает, что Ломов пришел попросить деньги, которые он ему давать не собирается. Затем он задает ему вопрос, вызывающий беспокойство.

ЛОМОВ: Понимаете, уважаемый Степаныч… Прошу прощения, Степан Достопочтенный … То есть я ужасно взволнован, как вы заметите … Короче, вы один можете мне помочь, хотя я этого, конечно, не заслуживаю … и не вправе рассчитывать на вашу помощь…

Помилование — простить или извинить (лицо, ошибка или проступок)

Ужасно- очень; чрезвычайно

Помощь — действие по оказанию помощи кому-либо

Чрезвычайно возбужденный и нервный, Ломов даже не мог нормально говорить до такой степени, что не мог правильно определить имя Чубукова.Он просит прощения у Чубукова за явно видимое волнение. Ломов говорит ему, что он единственный человек, который может помочь ему в ситуации, хотя он этого не заслуживает и не имеет права просить об этом.

ЧУБУКОВ: Да не ходи туда-сюда, милый! Выкладывай! Хорошо?

По кругу — не доходя до главного

Выкладывай — говори

Чубуков не понял, о чем имел в виду Ломов, и поэтому сказал ему говорить напрямую.

ЛОМОВ: Минутку … прямо сейчас. Дело в том, что я пришла просить руки вашей дочери Натальи Степановны в браке.

Искать руки девушки в браке — сделать предложение

Ломов наконец говорит, только чтобы признаться, что он пришел просить руки своей дочери замуж.

ЧУБУКОВ: [радостно] Ей-богу! Иван Василевич! Повторите еще раз — я не все слышал!

Юпитер- Богом

Чубуков не мог поверить в то, что только что услышал, от восторга и поэтому просит Ломова повторить то, что он только что сказал.

ЛОМОВ: Имею честь спросить …

Как только Ломов продолжает повторять свои слова, его прерывает очень взволнованный Чубуков.

ЧУБУКОВ: [перебивает] Батюшка … Я так рад и так далее … Да, действительно, и все такое. [Обнимает и целует Ломова] Я давно на это надеялся. Это было моим постоянным желанием. [Проливает слезу] И я всегда любил тебя, мой ангел, как будто ты был моим собственным сыном. Дай Бог вам обоим — Свою помощь, и Его любовь, и так далее, и столько надежды… Зачем я веду себя таким идиотским образом? Я теряю равновесие от радости, совершенно не в себе! Ох, всей душой … Пойду позову Наташу и все такое.

Желание — сильное чувство желания чего-либо или желания, чтобы что-то произошло

Idiotic — очень тупой; глупый

Чрезвычайно обрадованный, Чубуков выражает свою жизнерадостность и удовлетворенность. Ему не хватало слов, чтобы выразить свое приподнятое настроение. Ошеломленный, увидев исполнение своего давнего желания, он поцеловал Ломова.Он не мог сдерживаться, но прослезился, услышав эту новость. Он предложил свое благословение и Ломову, и его дочери Наташе, прежде чем осознал, что вел себя глупо. Затем он звонит Наташе, чтобы сообщить ей отличную новость.

ЛОМОВ: [взволнованно] Достопочтенный Степан Степанович, как вы думаете, я могу рассчитывать на ее согласие?

Согласие — согласие на выполнение каких-либо действий

Ломов спрашивает Чубукова, согласна ли Наталья на этот брак.

ЧУБУКОВ: Ну, конечно, милый, а… как будто она не согласится! Она влюблена; эгад, она похожа на влюбленную кошку и так далее. Не долго! [Выход]

Egad- восклицание ( выражает удивление, гнев или подтверждение)

Тоска по любви — тоска, тоска или желание

Чубуков заявляет, что Наталья не может не согласиться, потому что она тоскует по его любви. Затем он выходит, чтобы позвонить ей и дать им возможность поговорить наедине.

ЛОМОВ: Холодно… Я весь дрожу, как будто мне предстояло обследование. Самое замечательное в том, что я должен принять решение. Если я даю себе время подумать, колебаться, много говорить, искать идеал или настоящую любовь, то я никогда не выйду замуж. Брр … Холодно! Наталья Степановна — отличная хозяйка, неплохая, образованная. Что еще мне нужно? Но у меня в ушах шумит от волнения. [Пьет] И я не могу не выйти замуж. Во-первых, мне уже 35 лет, так сказать, критический возраст.Во-вторых, я должен вести спокойный и размеренный образ жизни. У меня учащенное сердцебиение, я легко возбудима и всегда ужасно расстраиваюсь; в этот самый момент мои губы дрожат, а правая бровь подергивается. Но хуже всего то, как я сплю. Я не успеваю ложиться спать и начинаю отрываться, как вдруг что-то в моем левом боку тянется, и я чувствую это плечом и головой … Я подпрыгиваю как сумасшедший, немного хожу и ложусь снова, но как только я начинаю засыпать, я снова тянусь! И это может случиться двадцать раз… [входит Наталья Степановна.]

Дрожь — дрожь или дрожь, как правило, в результате возбуждения, беспокойства или слабости.
Нерешительность — пауза в нерешительности перед тем, как что-то сказать или сделать.
Домработница — человек, ведущий домашнее хозяйство. возбуждение, напряжение или болезнь
Подергивание — внезапное быстрое мгновение или чувство
Сумасшедший — психически больной (не в техническом использовании)

Ломов нервничает и дрожит всем телом, как будто ему предстоит обследование.Он чувствует, что то, что он уже принял решение, идет в его пользу, потому что, если бы он дал себе время подумать над этим, его брак в конечном итоге был бы отложен или, что еще хуже, был отменен. Он уверяет себя, что Наталья Степановна будет отличным партнером, потому что она среднего вида, отличная домработница и хорошо образованная. Что еще можно было пожелать? Все еще возбужденный, он чувствовал какие-то шумы в ушах. Он не позволил себе отказаться от женитьбы после того, как достиг критического возраста 35 лет, потому что хотел жить нормальной и обычной жизнью.Обычно он страдает аномально высокой частотой сердечных сокращений и легко расстраивается. Даже в этот момент его губы дрожали, а брови подергивались. Кроме того, он плохо спит. Каждый раз, когда он спит, он чувствует тягу к правой стороне головы и плеча. Затем он прыгает, ходит и ложится, но как только он засыпает, его снова тянет. Это происходит примерно 20 раз.

НАТЛЯ: Ну вот! Это ты, и папа сказал: «Иди; Купец пришел за своим товаром.- Как поживаете, Иван Васильевич?

Дочь Чубукова Наталья выходит на сцену и, к своему удивлению, видит Ивана Васильевича. Ее отец сказал ей, что какой-то торговец ждал, чтобы получить свой товар.

ЛОМОВ: Как поживаете, уважаемая Наталья Степановна?

Ломов спрашивает о ее благополучии.

НАТАЛЬЯ: Извините, мой фартук и халат. Горох лущим для сушки. Почему ты не был здесь так долго? Садитесь… [Они садятся.] Вы не пообедаете?
Пеньюар — форма ночной рубашки

Она извиняется за свой фартук и платье, так как горох чистили, чтобы высушить, и просит его устроиться поудобнее. Она даже предлагает ему обед.

ЛОМОВ: Нет, спасибо, уже поел.

Когда его просят пообедать, Ломов говорит ей, что уже поел.

НАТАЛЬЯ: Тогда кури. Вот спички. Погода сейчас отличная, но вчера было так сыро, что рабочие весь день ничего не делали.Сколько сена вы уложили? Подумать только, я почувствовал себя жадным и срезал все поле, а теперь мне это совсем не нравится, потому что я боюсь, что сено может сгнить. Мне следовало немного подождать. Но что это? Да ты в вечернем платье! Ну я никогда! Ты собираешься на бал что ли? Хотя я должен сказать, что ты выглядишь лучше … Скажи мне, почему ты так встал?

Затем она предлагает Ломову закурить. Она рассказывает о прекрасной погоде, которая была у них в тот день, и о том, как плохо было накануне, что рабочие не могли ничего делать весь день.Она начинает говорить о своем стоге сена и о том, как она была достаточно жадной, чтобы вырубить все поле, что ее сейчас беспокоит. Во время разговора она вдруг замечает его платье и догадывается, идет ли он на бал. Она делает ему комплимент и спрашивает о поводе.

ЛОМОВ: [взволнованно] Видите ли, уважаемая Наталья Степановна … Дело в том, что я решил попросить вас выслушать меня … Конечно, вы удивитесь и, может быть, даже рассердитесь, но … [в сторону] Ужасно холодно!

Ломов начинает говорить и предупреждает ее, что она может быть удивлена ​​или даже рассержена, услышав.Ему странно холодно.

НАТАЛЬЯ: В чем дело? [пауза] Ну?

Наталья спрашивает его, о чем он заботится.

ЛОМОВ: Постараюсь быть кратким. Вы должны знать, уважаемая Наталья Степановна, что я издавна, с детства имел честь знать вашу семью. Моя покойная тетя и ее муж, от которых, как вы знаете, я унаследовал свою землю, всегда очень уважали вашего отца и вашу покойную мать. Ломовы и Чубуковы всегда относились друг к другу самым дружелюбным и, можно сказать, самым нежным образом.И, как вы знаете, моя земля — ​​ваш ближайший сосед. Вы помните, что мои Бычьи луга касаются ваших березовых рощ.

Унаследовано — получено в качестве наследника после смерти предыдущего владельца
Ласково — с готовностью испытывающим или проявляющим нежность или нежность
Волосы луга — земля, полная травы для пастбищ животных в
Березовых рощах — березовый лес

Ломов старается быть кратким в своем подходе. Он начинает с того, что с самого начала напоминает о хороших отношениях между обеими семьями.Его покойная тетя и ее муж уважали родителей Натальи. Он даже упоминает, что их земли соседствуют друг с другом, а его Бычьи луга касаются их березовых рощ.

НАТАЛЬЯ: Простите, что прерываю вас. Вы говорите: «Мои Воловьи луга». Но они твои?

Наталья ставит под сомнение честность Ломова, спрашивая, действительно ли Волки-луга, которые, по его словам, принадлежат ему, принадлежат ему.

ЛОМОВ: Да, мой.

Утверждает Ломов.

НАТАЛЬЯ: О чем ты говоришь? Волчьи луга наши, а не твои!

Она не могла поверить в то, что слышала, потому что, по ее словам, Бычьи Луга принадлежат ей.

ЛОМОВ: Нет, моя, уважаемая Наталья Степановна.

Ломов восклицает, что они его!

НАТАЛЬЯ: Я этого раньше не знала. Как вы это понимаете?

Наталья говорит, что не знала об этом, и попросила у Ломова объяснений.

ЛОМОВ: Как? Я говорю о тех Бычьих лугах, которые вклиниваются между твоими березовыми рощами и выжженным болотом.

Ломов уточняет и указывает именно на Бычьи луга, о которых он говорит, те, что вклиниваются между березовыми рощами и выжженным болотом.

НАТАЛЬЯ: Да-да … они наши.

Наталья также подтверждает, что говорит только об этих лугах.

ЛОМОВ: Нет, вы ошибаетесь, уважаемая Наталья Степановна, они мои.

Ломов считает, что у Натальи какое-то недоразумение, потому что он очень уверен, что они его.

НАТАЛЬЯ: Вдумайтесь, Иван Васильевич! Как долго они были твоими?

Натлая говорит Ломову подумать, как долго Быки луг были его.

ЛОМОВ: Как долго? Сколько себя помню.

Ломов отвечает, что они были его навсегда.

НАТАЛЬЯ: Право, вы не заставите меня поверить в это!

Наталья отметила, что не может ему поверить.

ЛОМОВ: А по документам видно, уважаемая Наталья Степановна. Да, Вычьи луга когда-то были предметом споров, но теперь все знают, что они мои. Не о чем спорить. Видите ли, бабушка моей тети передала эти Луга в бесплатное пользование на неограниченное время крестьянам деда вашего отца, в обмен на которые они должны были делать для нее кирпичи. Крестьяне, принадлежащие деду вашего отца, свободно пользовались Лугами в течение сорока лет и привыкли считать их своими собственными, когда это случилось…
Perpetuity — состояние или качество вечности

Ломов упоминает, что у него есть доказательства того, что земля принадлежит ему. Он даже подчеркивает, что когда-то воловьи луга были спорной собственностью, но проблема была решена, и теперь они принадлежат ему.

Он возвращается к его истории и уточняет, что бабушка его тети передала в бесплатное пользование эти Луга на неограниченное время крестьянам деда ее отца. По его словам, он был дан на сорок лет, и крестьяне привыкли считать его своим.

НАТАЛЬЯ: Нет, это совсем не так! И дед, и прадед считали, что их земля простиралась до Сожженных болот, а это значит, что Бычьи луга были нашими. Я не понимаю, о чем спорить. Это просто глупо!

Счетно — установлено расчетом

Наталья не согласна! С детства она слышала от деда и прадеда, что их земля простиралась до Сожженного болота. Она полностью им доверяет и не видит смысла спорить о ее принадлежности.

ЛОМОВ: Я покажу вам документы, Наталья Степановна!

Ломов настаивает на том, чтобы показать ей доказательства.

НАТАЛЬЯ: Нет, ты просто шутишь или издеваешься надо мной. Какой сюрприз! Земля у нас почти триста лет, а потом нам вдруг говорят, что она не наша! Иван Васильевич, не верю своим ушам. Эти луга для меня ничего не стоят. Они стоят всего пять десятин, а стоят, наверное, 300 рублей, но я не терплю несправедливости.Что ни говори, я не терплю несправедливости.

Наталья считает это своего рода шуткой, потому что она считает, что земля принадлежит им вот уже триста лет, а теперь кто-то приходит и заявляет, что это его собственность. Земля хоть и не стоит, всего около 300 рублей, но Наталья очень недовольна несправедливостью.

ЛОМОВ: Выслушайте меня, умоляю! Крестьяне деда вашего отца, как я уже имел честь вам объяснить, пекли кирпичи для бабушки моей тети.Теперь бабушка моей тети, желая сделать их приятными …

Умолять — искренне умолять кого-нибудь сделать что-нибудь

Ломов умоляет Наталью хотя бы послушать то, что он пытается сказать. Он упоминает, что крестьяне ее прадеда пекли кирпичи для бабушки его тети, и пока он продолжал говорить, его прервала Наталья.

НАТАЛЬЯ: Я не могу разобрать все это про тётушек, дедушек и бабушек. Луга наши, вот и все.

Наталья выражает свое нежелание слушать какие-либо его сказки. Она знает только одно; Бычьи луга принадлежат ей!

ЛОМОВ: Мой.

Ломов говорит, что они его.

НАТАЛЬЯ: Наши! Вы можете доказывать это два дня подряд, можете пойти и надеть пятнадцать фраков, но я говорю вам, что они наши, наши, наши! Мне не нужно ничего твоего, и я не хочу ничего отдавать. Так что!

Наталья не соглашается и говорит ему, что он может сделать все, чтобы доказать свою теорию, или носить пятнадцать таких курток (это означает, что она не подпадет под влияние его хорошо одетого), но она никогда не примет тот факт, что они его .Она поясняет, что ничего не хочет от него и не намерена отдавать что-либо, что принадлежит ей, но воловьи луга принадлежат ей.

ЛОМОВ: Наталья Степановна, я не хочу Лугов, но действую из принципа. Если хотите, я подарю вам их.

Ломов поясняет, что даже он не очень дорожит Бычьими лугами, но он просто честен и действует из принципа. Он даже предложил ей подарить луга.

НАТАЛЬЯ: Я сама могу подарить вам их, потому что они мои! Ваше поведение, Иван Васильевич, как минимум странно! До этого мы всегда считали вас хорошим соседом, другом; В прошлом году мы одолжили вам молотилку, хотя из-за этого нам пришлось отложить обмолот до ноября, но вы относитесь к нам, как к цыганам.Действительно, отдать мне мою землю! Нет, правда, это совсем не по-соседски! На мой взгляд, это даже нагло, если хотите знать.

Цыгане — группа кочевников, путешествующих с одного места на другое

Наглый — не проявляющий должного уважения к другому человеку

Наталья предлагает подарить их ему, потому что на самом деле они ее. Она шокирована тем, как он предлагает подарить ее собственность только ей. Она упоминает, что он вел себя очень странно, и до этого они думали о нем как о дружелюбном соседе, но теперь он совсем не ведет себя по-соседски.Семья Натальи предложила ему молотилку в прошлом году, даже если это означало задержку их собственного процесса, но он обращался с ними странно. Она чувствует, что он не проявляет к ним должного уважения.

ЛОМОВ: Значит, вы разобрались, что я лендграбер? Мадам, я никогда в жизни не захватывала чужую землю, и я не позволю никому обвинить меня в этом. [Быстро подходит к графину и пьет еще воды] Волчьи луга — мои!

Графин — стеклянная колба с открытым верхом, используемая для подачи вина или воды в ресторане

Он воспринимает это так, будто Наталья обвиняет его в том, что он грабитель земли.Он обижается и упоминает, что ни разу за всю свою жизнь не схватил то, что ему не принадлежит. Он терпеть не может, когда его обвиняют в том же. Потягивая воду, он упоминает, что Бычьи луга принадлежат ему.

НАТАЛЬЯ: Неправда, они наши!

Наталья до сих пор настаивает, что они их.

ЛОМОВ: Мой!

Ломов непреклонен в своей точке зрения.

НАТАЛЬЯ: Это неправда! Я это докажу! Я сегодня же пришлю своих косилок на Луга!

Косилки — человек, который косит траву косилкой

Наталья чувствует необходимость доказать свое право собственности и поэтому решает отправить косилки на место в тот же день.

ЛОМОВ: Что?

Ломов не может поверить в то, что говорит Наталья.

НАТАЛЬЯ: Мои косилки будут сегодня же!

Наталья настаивает на том, чтобы косилки были в тот же день.

ЛОМОВ: В шею отдам!

Ломов угрожает, что ударит косилки Натальи.

НАТАЛЬЯ: Смейте!

Наталья угрожает, что он не решится на такое.

ЛОМОВ: [Хватается за сердце] Воловьи луга — мои! Вы понимаете? Мой!

Ломов становится агрессивным и высоким тоном упоминает, что Быки луга — его и его единственные.

НАТАЛЬЯ: Пожалуйста, не кричите! Вы можете хрипло кричать в собственном доме, но здесь я прошу вас сдержаться!

Хриплый — грубый и резкий

Restrain — запретить что-либо делать; держать под контролем или в пределах

Наталья просит Ломова вести себя хорошо и не кричать в ее доме.

ЛОМОВ: Если бы этого не было, сударыня, из-за этого ужасного, мучительного сердцебиения, если бы у меня все внутри не было расстроено, я бы по-другому с вами разговаривал! [Кричит] Воловьи луга — мои!

Мучительно — очень болезненно; разорвать; острый; крайний

Сердцебиение — сердцебиение

Он упоминает о своей чрезвычайно болезненной учащенной частоте сердечных сокращений и винит это за свой тон. Даже в такой боли он не перестает требовать Бычьи луга.

НАТАЛЬЯ: Наши!
ЛОМОВ: Мой!
НАТАЛЬЯ: Наши!
ЛОМОВ: Мой! [Входит Чубуков]
ЧУБУКОВ. В чем дело? Что ты кричишь?

Услышав, что они оба дерутся, входит Чубуков, чтобы проверить их, и спрашивает, о чем идет речь.

НАТАЛЬЯ: Папа, пожалуйста, скажи этому джентльмену, который владеет Воловыми лугами, мы или он?

Наталья просит отца подтвердить право собственности на Oxen Meadows.

ЧУБУКОВ: [Ломову] Милый, Луга наши!

Чубуков говорит Ломову то же, что и Наталья; Бычьи луга принадлежат им!

ЛОМОВ: Но, пожалуйста, Степан Степанович, как они могут быть вашими? Будь разумным человеком! Бабушка моей тети передала Луга во временное и бесплатное пользование крестьянам твоего деда.Крестьяне использовали землю сорок лет и привыкли к ней как к своей, когда случилось так …

Ломов ставит под сомнение претензию Чубукова и требует, чтобы он был обоснован. Он продолжает объяснять ему свою версию истории, но его прерывает Чубуков.

ЧУБУКОВ: Простите, моя дорогая. Вы забываете только то, что крестьяне не заплатили вашей бабушке и все такое, потому что Луга спорили, и так далее. А теперь все знают, что они наши.Значит, вы не видели плана.

Чубуков перебивает и поправляет его, говоря, что единственная причина, по которой крестьяне получили возможность бесплатно пользоваться Бычьими лугами, заключалась в том, что это была спорная земля. Но теперь всем ясно, что это Чубуковы. Он даже обвиняет его в том, что он не видел плана.

ЛОМОВ: Докажу, что они мои!
ЧУБУКОВ: Не докажешь, милый —

Чубуков считает, что Ломов не может доказать, что что-то принадлежит ему, если это не так.

ЛОМОВ: Я буду

Ломов настаивает на том, чтобы доказать, что это его .

ЧУБУКОВ: Милый, а чего так кричать? Криком ничего не докажешь. Я не хочу ничего вашего и не собираюсь отказываться от того, что у меня есть. Почему я должен? И вы знаете, мои возлюбленные, что если вы собираетесь продолжать спорить об этом, я скорее уступлю Луга крестьянам, чем вам. Там!

Чубуков также указывает, что кричать незачем.Крик ничего не докажет. Он повторяет те же слова, что и Наталья, и говорит, что не намерен претендовать на то, что ему не принадлежит, а также не хочет отдавать то, что принадлежит ему. Он в гневе говорит, что, если Ломов и дальше будет спорить о земле, он скорее отдаст ее крестьянам бесплатно, чем ему.

ЛОМОВ: Не понимаю! Как вы имеете право отдать чужую собственность?

Ломов обижается и спрашивает, как он может отдать чужую собственность.

ЧУБУКОВ: Можете считать, что я знаю, имею я право или нет. Потому что, молодой человек, я не привык, чтобы со мной разговаривали таким тоном и так далее. Я, молодой человек, вдвое старше вас и прошу вас говорить со мной, не волнуясь, и все такое.

Чубукова раздражает тон, которым Ломов разговаривал с ним. Он упоминает, что вдвое старше его и заслуживает уважения, вежливости и всего такого.

ЛОМОВ: Нет, ты просто думаешь, что я дурак, и хочешь, чтобы я был! Вы называете мою землю своей и хотите, чтобы я разговаривал с вами спокойно и вежливо! Так не ведут себя добрые соседи, Степан Степанович! Ты не сосед, ты грабитель!

Ломов настаивает, что его невежливый тон является реакцией на то, что делает Чубуков, то есть претендует на землю Ломова.Он называет Чубукова плохим соседом и грабителем.

ЧУБУКОВ: Это что? Что вы сказали?

Чувствуя себя неуважением, Степан просит Ломова повторить его слова.

НАТАЛЬЯ: Папа, сейчас же пошли косилки на Луга!

Вмешивается Наталья и просит отца немедленно отправить косилок на Бычьи луга.

ЧУБУКОВ: Что вы сказали, сэр?

Все еще не в силах принять то, что он только что услышал о себе, он просит Ломова повторить его слова.

НАТАЛЬЯ: Бычьи луга — наши, и я не откажусь от них, не откажусь, не откажусь!

Наталья утверждает, что владеет воловьими лугами, и отказывается отпускать их только потому, что кто-то другой утверждает, что они принадлежат им.

ЛОМОВ: Посмотрим! Я передам дело в суд, а потом покажу вам!

Ломов угрожает обратиться в суд и доказать им, что он является настоящим владельцем.

ЧУБУКОВ: В суд? Вы можете обратиться в суд и все такое! Ты можешь! Я знаю тебя; вы просто ищете возможность обратиться в суд и все такое.Ах ты хулиган! Все ваши люди были такими! Все они!

Петтифоггер — практикующий юрист низшего уровня, особенно тот, кто занимается мелкими делами или использует сомнительную практику

Чубуков обвиняет Ломова в том, что он просто ищет возможности обратиться в суд, как и все люди в его семье. Он настаивает на продолжении разбирательства.

ЛОМОВ: Забудь о моем народе! Все Ломовы были людьми честными, и ни одного человека не судили за хищение, как вашего деда!

Хищение — кража или присвоение средств, переданных в доверительное управление или принадлежащих своему работодателю

Ломов отказывается слушать что-либо против своей семьи и упоминает, что все они респектабельные личности, в отличие от деда Чубукова, которого судили за хищение.

ЧУБУКОВ: Вы, Ломовы, помешались в семье, все вы!

Безумие — состояние безумия; безумие (не в техническом обиходе)

Чубуков упоминает о безумии и иррациональности Ломовых.

НАТАЛЬЯ: Все, все, все!

Наталья повторяет вслед за отцом.

ЧУБУКОВ: Ваш дедушка был пьяницей, а ваша младшая тетя Настасья Михайловна сбежала с архитектором и так далее…

Пьяница — постоянно пьяный

Чубуков называет деда Ломова алкоголиком и сообщает, что младшая тетя Ломова сбежала с архитектором.

ЛОМОВ: А мать горбатая была. [Хватается за сердце] Что-то тянет меня в бок … Моя голова … Помогите! Воды!

Горб — округлый выступ, обнаруженный как аномалия на спине человека

Ломов упоминает, что мать Чубукова была горбатой.Говоря это, он почувствовал, как его тянет за голову и за бок. Таким образом, он призывает на помощь и воду.

ЧУБУКОВ: Ваш отец был жадным игроком!

Guzzling- жадный (здесь)

Игрок — человек, играющий в азартные игры; спекулянт

Пока ведется игра с обвинениями, Чубуков называет отца Ломова жадным игроком.

НАТАЛЬЯ: Да и сплетников, равных твоей тете, было не так уж много!

Наталья называет тетю Ломова клеветой и что никто не может сравниться с ее уровнем.

ЛОМОВ: У меня левая нога уснула … Вы интриган … Ах, сердце мое! И ни для кого не секрет, что перед прошлыми выборами вы … я вижу звезды … Где моя шляпа?

Интриган — обманщик, обманщик или мошенник

Ломов жалуется на онемение стопы. Называет Чубукова заговорщиком. Сая, что у него боль в сердце. Он добавляет, что на последних выборах Чубуков был… он не заканчивает приговор, так как у него кружится голова.Он требует свою шляпу.

НАТАЛЬЯ: Низко! Это нечестно! Это значит!

Наталья называет его поступок низким, нечестным и подлым.

ЧУБУКОВ: А вы злой двуличный интриган! Да!

Злонамеренное намерение или намерение причинить вред

Чубуков далее называть его именами.

ЛОМОВ: Вот моя шляпа. Мое сердце! Каким образом? Где дверь? О, я думаю, что умираю! Моя нога совсем онемела… [Идет к двери.]

Numb — лишен силы физического ощущения

Ломов наконец находит свою шляпу и начинает спрашивать направление к двери. С колотящимся сердцем и онемевшими ногами он чувствует, что умирает.

ЧУБУКОВ: [вслед за ним] И больше не ступай в мой дом!

Чубуков кричит от гнева и говорит Ломову больше не ступать в его дом.

НАТАЛЬЯ: Подайте в суд! Посмотрим! [Ломов, пошатываясь, выходит.]

И Наталья велит ему обратиться в суд, чтобы показать, что они не боятся.

ЧУБУКОВ: Черт возьми! [Ходит в возбуждении.]

Чубуков призывает чертей забрать Ломова.

НАТАЛЬЯ: Подлец! Какое после этого можно доверять соседям!

Мошенник-дьявол

Наталья комментирует, что Ломов — дьявол и ненадежен.

ЧУБУКОВ: Злодей! Пугало!

Далее Чубуков называет его имена.

НАТАЛЬЯ: Чудовище! Сначала он забирает нашу землю, а затем имеет наглость оскорблять нас.

Наглость- дерзость

Наталья удивлена, как Ломов сначала заявил, что их земля принадлежит ему, а затем осмелился оскорбить их.

ЧУБУКОВ: А эта слепая курица, да, у этого репы-привидения смущенная щека делает предложение и так далее! Какие? Предложение!

Проклиная его и обзывая по именам, Чубуков раскрывает настоящую причину визита Ломова, которая была омрачена аргументами, связанными с Воловыми лугами.Он не мог поверить в свою дерзость, сделав предложение для ее дочери.

НАТАЛЬЯ: Какое предложение?

Не зная, о чем идет речь, Наталья спрашивает папу, о каком предложении он говорит.

ЧУБУКОВ: Да ведь он пришел сделать вам предложение.

Чубуков уточняет, что Ломов пришел сюда просить руки Натальи.

НАТАЛЬЯ: Сделать предложение? Мне? Почему ты не сказал мне об этом раньше?

Удивленная, услышав это, Наталья говорит отцу, что он должен был сказать ей это раньше.

ЧУБУКОВ: Так он переодевается в вечерние наряды. Фаршированная колбаса! Изумительный болван!

Далее он называет имена Ломова и выражает неудовольствие, увидев его дерзость прийти сюда в вечернем платье.

НАТАЛЬЯ: Сделать мне предложение? Ах! [Падает в кресло и вопит] Верни его! Назад! Ах! Приведи его сюда.

Наталья ошеломлена этой новостью. Она падает в кресло и немедленно требует перезвонить.

ЧУБУКОВ: Кого сюда приведите?

Чубуков не очень понимает, о ком идет речь.

НАТАЛЬЯ: Быстро, быстро! Я болен! Приведи его! [Истерика.]

Она велит отцу перезвонить ему прямо сейчас.

ЧУБУКОВ: Это что? Что с тобой? [Хватается за голову] О, несчастный я человек! Я застрелюсь! Я повешусь! Мы сделали для нее!

Чубуков не смог зафиксировать изменение поведения Натальи по отношению к Ломову и, таким образом, называет себя несчастным человеком.Он намеревается застрелиться или повеситься.

НАТАЛЬЯ: Я умираю! Приведи его!

Наталья говорит, что умирает. Вызовите Ломова.

ЧУБУКОВ: Тфу! Сразу. Не кричи! [Заканчивается. Пауза.]

Чубуков просит дочь успокоиться и перестать кричать. Он убегает, чтобы позвонить Ломову.

НАТАЛЬЯ: [Наталья Степановна вопит.] Что они со мной сделали? Верни его! Приведи его! [Пауза.Вбегает Чубуков.]

Наталья просит отца поторопиться. Чубуков возвращается.

ЧУБУКОВ: Идет и так далее, черт его! Ой! Поговорите с ним сами; Я не хочу …

Сообщает Наталье, что идет Ломов. Он не собирается с ним разговаривать и поэтому просит ее самой поговорить с ним.

НАТАЛЬЯ: [вопит] За ним!

Наталья плачет по Ломову.

ЧУБУКОВ: [кричит] Он идет, говорю вам.О, какое бремя, Господи, быть отцом взрослой дочери! Я действительно перережу себе горло! Мы проклинали его, оскорбляли, выгнали его; и это все ты … ты!

Он не может принять то, что только что произошло. Он чувствует, что быть взрослой дочерью — это и бремя, и проклятие. Он хочет перерезать себе глотку, потому что в один момент они ругали, оскорбляли и выгнали его из своего дома, а в другой они зовут его обратно, чтобы принять предложение.

НАТАЛЬЯ: Нет, это ты!

Наталья обвиняет отца в жестоком обращении с ним.

ЧУБУКОВ: Я говорю вам, что я не виноват. [Ломов появляется в дверях] А теперь поговорите с ним сами. [Выход]

Чубуков поясняет, что когда Ломов появляется в дверях, это не его вина, он просит Наталью разобраться с ситуацией самой.

ЛОМОВ: [Входит Ломов, измученный.] Сердце ужасно бьется. Моя нога уснула. Что-то тянет в мою сторону …

Входит Ломов совершенно обессиленный.Он плохо себя чувствует из-за учащенного сердцебиения, онемения ног и тянет с одной стороны.

НАТАЛЬЯ: Простите нас, Иван Васильевич, мы все немного разгорячились. Теперь я вспоминаю: Воловьи луга … действительно твои.

Наталья, на удивление совершенно другим тоном, разъясняет, как к нему относились раньше. Она внезапно вспоминает, что Бычьи луга принадлежат ему.

ЛОМОВ: Мое сердце ужасно бьется. Мои Луга … Мои брови подергиваются….

Пытаясь поговорить о Лугах, он говорит, что его сердце колотится, а брови подергиваются.

НАТАЛЬЯ: Луга твои, да, твои. Садись. [Они сидят] Мы ошибались.

Наталья подтверждает, что Бычьи луга его, и просит его сесть. Она принимает свою ошибку и говорит, что они ошибались.

ЛОМОВ: Принципиально сделал. Моя земля мне ничего не стоит, но принцип …

Ломов сказал, что земля хоть и мало стоит, но действует он из принципа.Он просто был честен.

НАТАЛЬЯ: Да, в принципе, именно так. А теперь поговорим о другом.

Наталая говорит ему сменить тему в надежде поднять предложение.

ЛОМОВ: Тем более, что у меня есть доказательства. Бабушка моей тети отдала землю крестьянам деда твоего отца …

Ломов не останавливается на достигнутом и снова упоминает, что бабушка его тети передала землю крестьянам деда своего отца.

НАТАЛЬЯ: Да, да, пусть пройдет. [в сторону] Хотел бы я знать, с чего он начал. [вслух] Вы собираетесь скоро приступить к съемкам?

Наталья просит сменить тему. Она думает, как заставить его обсудить предложение руки и сердца. Она спрашивает Ломова, возобновит ли он стрельбу.

ЛОМОВ: Подумываю, почтенная Наталья Степановна, после жатвы поиграться с черным петухом. О, ты слышал? Подумать только, какое у меня было несчастье! Моя собака Guess, которую вы знаете, хромала.

Хромой — неспособный ходить без затруднений в результате травмы или болезни ноги или ступни; хромая

В ответ на вопрос Ломов делится своими планами насчет съемок. После сбора урожая он планирует пойти к черному петуху. Затем он делится новостью о том, что его собака Угадайка испытывает трудности при правильной ходьбе.

НАТАЛЬЯ: Какая жалость! Почему?

Она выказывает сочувствие и спрашивает, как он хромал.

ЛОМОВ: Не знаю.Должно быть, его ногу подвернула или укусила какая-то другая собака. [вздыхает] Моя лучшая собака, не говоря уже о расходах. Я отдал за него Миронову 125 рублей.

Ломов не уверен в причине, но подозревает, что ему, возможно, выкрутила ногу или укусила другая собака. Он очень сожалеет об этом, так как это была его лучшая собака, и он заплатил за нее большую сумму — 125 рублей.

НАТАЛЬЯ: Это было уж слишком, Иван Васильевич.

Наталья думает, что он заплатил очень высокую цену за такую ​​собаку.

ЛОМОВ: Я думаю, это было очень дешево. Он первоклассный пес.

Он считает, что это было очень мало для такой первоклассной собаки, как Угадай.

НАТАЛЬЯ: Папа дал 85 рублей за свой Squeezer, а Squeezer на много лучше, чем Guess!

Она упоминает, что он скорее отдал 85 рублей за ее собаку Соковыжималку, которая намного лучше, чем Guess.

ЛОМОВ: Соковыжималка лучше, чем угадайка? Какая идея! [смеется] Squeezer лучше, чем Guess!

Он находит чрезвычайно забавным, что Squeezer лучше, чем Guess.

НАТАЛЬЯ: Конечно, лучше! Соковыжималка, конечно, молод, может немного развиваться, но по очкам и родословной он лучше всего, что есть даже у Волчанецкого.

Наталья уверенно говорит, что Squeezer в любой день лучше. Он молод, но может немного развиться. Он лучший по очкам и родословной, даже превосходит Волчанецкий.

ЛОМОВ: Простите, Наталья Степановна, но вы забываете, что он недокус, а промах всегда означает, что собака плохой охотник!

Ломов подчеркивает, что ее Соковыжималка — недокус, что означает, что он плохо охотится.

НАТАЛЬЯ: Он перескочил? Первый раз слышу!

Она не согласна с тем, что говорит Ломов о том, что Соковыжималка — недокус.

ЛОМОВ: Уверяю, у него нижняя челюсть короче верхней.

Он также подтверждает, говоря, что нижняя челюсть Squeezer меньше верхней.

НАТАЛЬЯ: Вы меряли?

ЛОМОВ: Да. Он, конечно, умеет следить, но если вы хотите что-нибудь заполучить…

Он упоминает, что Squeezer хорош, когда нужно просто следовать за кем-то, но не в других вещах, таких как захват чего-то.

НАТАЛЬЯ: Во-первых, наш Squeezer — это чистокровное животное, сын упряжи и зубил, а родословную вашей собаки вообще невозможно понять. Он стар и уродлив, как потрепанный извозчик.

Наталья хвастается тем, что ее собака чистокровная, сын Упряжи и Зубила. Она говорит, что Guess, с другой стороны, стар и уродлив, как изношенный извозчик.

ЛОМОВ: Он старый, но я бы не взял для него пять Соковыжималок. Зачем, как можно? Угадай — это собака; Что касается Squeezer, то тут уж смешно спорить. У любого, кого вы любите, есть такая же хорошая собака, как Squeezer … вы можете найти их почти под каждым кустом. Двадцать пять рублей были бы хорошей платой за него.

Ломов говорит, что хотя его собака и старая, но все же в любой день лучше, чем Squeezer, в том смысле, что он не променяет Guess на 5 Squeezer. Он не считает Squeezer экстраординарной собакой.Его можно найти почти под каждым кустом и стоит он не дороже 25 рублей.

НАТАЛЬЯ: В вас сегодня бес противоречия, Иван Васильевич. Сначала вы делаете вид, что Луга ваши; Теперь эта Guess лучше, чем Squeezer. Мне не нравятся люди, которые не говорят то, что имеют в виду, потому что вы прекрасно знаете, что Squeezer в сто раз лучше вашей глупой Guess. Почему вы хотите сказать, что это не так?

Наталья считает, что в суждении Ломова что-то не так.Сначала он ложно заявил, что Медоуз принадлежит ему, а затем он говорит, что Guess лучше, чем Squeezer. Она чувствует, что он не в своем уме и не имеет в виду то, что говорит, что ей абсолютно не нравится. Она не понимает, почему он считает свою собаку лучше Соковыжималки.

ЛОМОВ: Я вижу, Наталья Степановна, что вы меня либо слепым, либо дураком считаете. Вы должны понимать, что Squeezer промахнулся!

Ломов говорит, что Наталья считает его слепым или глупым, но настаивает на том, что ее собака недооценила.

НАТАЛЬЯ: Это неправда.
ЛОМОВ: Он есть!
НАТАЛЬЯ: Неправда!
ЛОМОВ: Зачем кричать, мадам?
НАТАЛЬЯ: Зачем болтовня? Это ужасно! Пора расстрелять твою Угадайку и сравнить его с Соковыжималкой!

Они снова начинают драться. Наталья говорит, что Ломов несёт чушь. Догадку нужно застрелить, а не сравнивать со Соковыжималкой.

ЛОМОВ: Извините, я не могу продолжать эту дискуссию, у меня сердце бешено колотится.

Ломов упоминает, что не может говорить на эту тему, так как его сердце бьется очень быстро.

НАТАЛЬЯ: Я заметила, что те охотники больше спорят, кто меньше всего знает.

Наталья насмехается над Ломовым и говорит, что те, кто больше всего спорит, знают меньше всего.

ЛОМОВ: Мадам, молчите, пожалуйста. Мое сердце разрывается на куски. [кричит] Заткнись!

Ломов велит Наталье молчать, потому что он плохо себя чувствует.

НАТАЛЬЯ: Не заткнусь, пока ты не признаешь, что Squeezer в сто раз лучше твоей Guess!

Наталья продолжает спорить и отказывается останавливаться, пока он не признает, что ее собака Squeezer лучше, чем его Guess.

ЛОМОВ: В сто раз хуже! Будьте повешены на свою соковыжималку! Его голова … глаза … плечо …

Ломов восклицает, что это никогда не могло быть правдой и что ее Соковыжималка — худшая.

НАТАЛЬЯ: Не надо вешать свою дурацкую догадку; он уже полумертвый!

Наталья говорит, что Guess старая и полумертвая.

ЛОМОВ: [плачет] Заткнись! Мое сердце разрывается!

Он говорит ей, чтобы она перестала спорить снова, так как его сердце бешено колотится.

НАТАЛЬЯ: Не заткнусь. [Входит Чубуков.]

Наталья молчать отказывается.

ЧУБУКОВ: В чем дело?

Входит Чубуков и на этот раз спрашивает, о чем идет речь.

НАТАЛЬЯ: Папа, скажи нам честно, какая собака лучше, наша Соковыжималка или его Угадайка.

Наталья, как и в прошлый раз, спрашивает Чубукова, кто лучше, зная его ответ.

ЛОМОВ: Степан Степанович, умоляю вас сказать мне только одно: у вас соковыжималка промахнулась или нет? Да или нет?

Ломов же задает ему более прямой вопрос. Он спрашивает, есть ли у его соковыжималки недокус или нет.

ЧУБУКОВ: А что, да? Что это значит? Во всем этом он лучший пес в округе и так далее.

Чубуков отвечает, что не имеет значения, даже если у Соковыжималки есть промах, потому что он лучшая собака в округе.

ЛОМОВ: А разве моя догадка не лучше? Правда сейчас?

Ломов, будучи непоколебимым в своем мнении, все же считает, что «Угадай» лучше, и просит того же Чубукова.

ЧУБУКОВ: Не волнуйся, моя дорогая. Позволь мне. У вашего предположения, безусловно, есть свои сильные стороны. Он породистый, крепко стоит на ногах, у него хорошо выпуклые ребра и все такое.Но, дорогой мой, если вы хотите знать правду, у этой собаки два недостатка: он старый и у него короткая морда.

Чубуков упоминает, что хотя Guess имеет определенные положительные качества, но он также обладает некоторыми недостатками. Он породист, крепок на ногах, у него хорошо изогнутые ребра и все такое, но зато он старый и коротышка.

ЛОМОВ: Простите, сердце … Возьмем факты. Вы помните, что на Марусинской охоте моя Догадка шла лицом к лицу с графской собакой, а ваша Соковыжималка осталась на целую версту позади.

Ломов отказывается принять это и начинает перечислять факты. Он начинает с упоминания об охоте на Марусинского, где Догадка составила хорошую конкуренцию собаке графа, но Соковыжималка отстала.

ЧУБУКОВ: Он остался позади, потому что кнут графа ударил его хлыстом.

Чубуков поясняет, что это произошло из-за того, что бедного Соковыжималки ударила плетью собака графа.

ЛОМОВ: И не без причины.Собаки бегают за лисой, когда Соковыжималка идет и начинает беспокоить овцу!

Ломов даже упоминает, что собаки бегали за лисой, в отличие от Соковыжималки, которая стала беспокоить овцу.

ЧУБУКОВ: Неправда! Дорогой мой, я очень склонен терять самообладание, и поэтому давайте прекратим спорить. Вы начали, потому что все всегда завидуют чужим собакам. Да мы все такие! Вы тоже, сэр, не безупречны! Вы не сразу начинаете с того, того, другого и всего такого… Я все помню!

Чубуков отказывается соглашаться и упоминает, что если они продолжат спорить, он очень легко может выйти из себя, поэтому предлагает прекратить бурную дискуссию. Он думает, что все завидуют чужим собакам. Кроме того, он очень хорошо знает, как Ломов будет продолжать спор, указывая на вещи, но он тоже все помнит.

ЛОМОВ: Я тоже помню!

Ломов восклицает, что даже он все помнит.

ЧУБУКОВ: [дразня] Я тоже помню! Что ты помнишь?

Чубуков дразняще повторяет: «Я тоже помню», а затем спрашивает, что он на самом деле помнит.

ЛОМОВ: Сердце … моя нога уснула. Я не могу …

Он плачет, что его сердце колотится, а нога онемела.

НАТАЛЬЯ: [поддразнивая] Сердце мое! Какой ты охотник? Тебе надо лечь на кухонную плиту и ловить черных жуков, а не гоняться за лисицами! Мое сердце!

Наталья дразнит Ломова, говоря о том, что за охотник тот, который все время повторяет: «Сердце мое! Мое сердце!» Он должен ловить черных жуков, а не лисиц.

ЧУБУКОВ: Да правда, ты вообще какой охотник? Вам следует сидеть дома с учащенным сердцебиением и не ходить за животными. Вы можете пойти на охоту, но вы только будете спорить с людьми, мешать их собакам и так далее. Давай сменим тему на случай, если я выйду из себя. В любом случае, ты совсем не охотник!

Чубуков соглашается с Натальей. Он говорит, что Ломов должен сидеть дома с учащенным сердцебиением. Он не должен идти за животными или, скорее, он может пойти и заняться тем, что у него получается лучше всего, то есть спорить, чья собака лучше.Он снова настаивает на отклонении от темы, иначе он может выйти из себя.

ЛОМОВ: А вы охотник? Вы идете на охоту только для того, чтобы сблизиться с графом и интриговать. О мое сердце! Вы интриган!

Он набрасывается на Чубукова, оскорбляя его, что он даже не настоящий охотник. Он идет туда только для того, чтобы его засчитали. Он повторяет про свое сердце, проклиная и называя его интриганом.

ЧУБУКОВ: Что? Я интриган? [кричит] Заткнись!

Чубуков кричит и говорит ему молчать.

ЛОМОВ: Интриган!
ЧУБУКОВ: Мальчик! Щенок!
ЛОМОВ: Старая крыса! Иезуит!

Они оба начинают друг друга обзывать!

ЧУБУКОВ: Заткнись, а то я тебя пристрелю, как куропатку! Ты дурак!
Патридж — короткохвостая охотничья птица с преимущественно коричневым оперением, встречается в основном в Европе и Азии

Чубуков угрожает Ломову застрелить его, как птицу, и называет дураком.

ЛОМОВ: Все это знают — о, сердце! — твоя покойная жена била тебя… Мои ноги … виски … искры … Я падаю, падаю!

Ломов начинает переходить на личности, хотя у него болят сердце и ноги. Он уточняет, что известно, что жена его избивала.

ЧУБУКОВ: А вы под тапкой своей экономки!

Чубуков в свою очередь говорит, что все знают, что он находится под контролем своей домработницы.

ЛОМОВ: Там, там, там … сердце разорвалось! Мои плечи оторвутся! Где мое плечо? Я умер.[Падает в кресло] Доктор!

Сердце Ломова словно лопнуло, и ему оторвалось плечо. Он внезапно падает в кресло и вызывает врача.

ЧУБУКОВ: Мальчик! Milksop! Дурак! Я болен! [Пьет воду] Больной!

Чубуков не перестает ругать его, пока пьет воду.

НАТАЛЬЯ: Какой ты охотник? На лошадь даже не сесть! [Отцу] Папа, что с ним? Папа! Смотри, папа! [кричит] Иван Васильевич! Он мертв!

Даже Наталья не перестает ругаться и вдруг замечает, что Ломов лежит неподвижно, как мертвый.

ЧУБУКОВ: Я болею! Я не могу дышать! Воздуха!

НАТАЛЬЯ: Он мертв. [Тянет Ломова за рукав.] Иван Васильевич! Иван Василевич! Что ты сделал со мной? Он мертв. [Падает в кресло] Врач, врач! [Истерика.]

Наталья, держа его за рукав, ожидает, что он мертв. Паникуя и плача, она просит отца вызвать врача.

ЧУБУКОВ: Ой! Что это? Что случилось?

Чубуков спрашивает Наталью, что случилось.

НАТАЛЬЯ: [вопит] Он мертв … мертв!

Наталья плачет, что Ломов мертв.

ЧУБУКОВ: Кто мертв? [Смотрит на Ломова] Так он и есть! Мое слово! Воды! Врач! [Подносит стакан ко рту Ломову] Выпей! Нет, не пьет. Значит, он мертв и все такое. Я самый несчастный из мужчин! Почему бы мне не пустить пулю в свой мозг? Почему я еще не перерезал себе горло? Чего я жду? Дайте мне нож! Дайте мне пистолет! [Ломов движется] Кажется, он приходит в себя.Выпей немного воды! Верно.

Чубуков тоже впадает в панику и пытается набить себе горло водой, но Ломов не пьет. Он приходит к выводу, что Ломов мертв, и начинает ругать себя. Он считает себя самым несчастным и задается вопросом, почему он еще не перерезал себе горло и не всадил себе пулю в мозг. Он вдруг замечает, что Ломов движется, и просит его выпить воды.

ЛОМОВ: Я вижу звезды … туман … где я?

Ломов, приходя в сознание, не понимает, где находится.Он ошеломлен.

ЧУБУКОВ: Торопитесь жениться и — ну черт с вами! Она готова! [Он кладет руку Ломова на руку дочери] Она хочет и все такое. Даю вам свое благословение и так далее. Только оставь меня в покое!

Чубуков в спешке просит его жениться на дочери именно в этот момент. Он кладет руку Натальи на руку Ломова и говорит, что она готова. Он дает им свои благословения и просит оставить его в покое и все такое.

ЛОМОВ: [вставая] А? Какие? Кому?

Ломов, все еще не подозревая о своем окружении, спрашивает Чубукова, за кого он просит его жениться.

ЧУБУКОВ: Она готова! Хорошо? Поцелуй и будь ты проклят!

Чубуков восклицает, что Наталья хочет, и настаивает на том, чтобы они целовались.

НАТАЛЬЯ: [вопит] Он жив … Да, да, согласен.

Наталья рада, что он жив, и поспешно сообщает, что готова выйти за него замуж .

ЧУБУКОВ: Поцелуйтесь!

Он просит их поцеловать друг друга.

ЛОМОВ: А? Поцелуй кого? [Они целуются] Тоже очень мило. Простите, а в чем дело? О, теперь я понимаю … мое сердце … звезды … я счастлива. Наталья Степановна … [Целует ее руку] Нога моя уснула.

Ломов не понимает, пока Наталья его не поцелует. Он внезапно вспоминает, возбуждается, затем целует ее руку, но жалуется, что его нога снова онемела.

НАТАЛЬЯ: Я … я тоже рада …

Наталья тоже выражает свое счастье.

ЧУБУКОВ: Какая тяжесть с плеч, ага!

Чубуков чувствует облегчение после женитьбы на дочери.

НАТАЛЬЯ: Но, все-таки признаешь сейчас, что Guess хуже Squeezer.

Наталья снова возобновляет тему о собаках и манипулирует им, чтобы он сказал, что ее Squeezer лучше, чем его Guess.

ЛОМОВ: Лучше!
НАТАЛЬЯ: Хуже!
ЧУБУКОВ: Ну вот и начало семейному блаженству! Выпей шампанского!
ЛОМОВ: Ему лучше!
НАТАЛЬЯ: Хуже! Худший! Худший!

Ломов и Наталья спорят, а Чубуков предлагает им выпить.

ЧУБУКОВ: [пытается ее крикнуть] Шампанское! Шампанское!

Чубуков, устав от борьбы, кричит, что пора шампанского.

ЗАВЕС

Важные видео Ссылки

Предложение — вопросы и ответы

1. Почему Чубуков сначала подозревает, что Ломов приехал? Он искренен, когда потом говорит: «И я всегда любил тебя, мой ангел, как будто ты был моим собственным сыном»? Найдите причины своего ответа в пьесе.

А. Чубуков подозревает, что Ломов пришел просить денег. Он не искренен, когда говорит, что любил его как своего сына, потому что мы замечаем, что Чубуков пытается быть дружелюбным и любящим на лице, в то время как внутри он груб и эгоистичен.

2. Чубуков говорит о Наталье: «… как будто она не соглашается! Она влюблена; эгад, она как влюбленная кошка…» Согласны? Найдите причины для своего ответа.

А. Я согласен с утверждением Чубукова, потому что, когда Наталья узнает, что Ломов приехал с предложением выйти замуж, она отчаянно нуждается в нем. Она начинает плакать и просит отца вернуть его.

3. Найдите в пьесе все слова и выражения, которыми персонажи говорят друг о друге, а также обвинения и оскорбления, которые они бросают друг другу.(Например, Ломов, в конце концов, называет Чубукова интриганом; но раньше Чубуков сам называл Ломова «злым, двуличным интриганом». И снова Ломов начинает с описания Натальи как «отличную экономку, неплохую, хорошо образованную». . ”)

A. Персонажи использовали несколько слов и выражений для описания друг друга. Некоторые из них следующие —

Чбуков — грабитель, интриган, старая крыса, иезуит.

Наталья — влюбленная кошка, отличная хозяйка, неплохая внешность, образованная.

Ломов — добрый сосед, друг, наглый, недовольный, злой двуличный интриган, проходимец, слепая курица, привидение репы, злодей, чучело, чудовище, фаршированная колбаса, идиотский олух, щенок, доярка.

Предложение — упражнения по грамматике

В. Найдите следующие фразы в словаре, чтобы узнать их значение, а затем используйте каждую в своем собственном предложении.
(i) Вы можете считать, что
(ii) Кажется, он приближается
(iii) Моя нога заснула

А.(i) Вы можете считать, что — что-то может быть истиной в манере, как сказано
Вы можете считать, что никто из нас не знает его.
(ii) Кажется, он приходит в себя — выходит из бессознательного состояния
Внезапно Ломов потерял сознание, но, похоже, через несколько секунд он пришел в себя.
(iii) Моя нога заснула — вы не чувствуете ногу в течение короткого времени.
Пока я сидел на полу, моя нога уснула.

В. Вот отрывок из статьи в Times of India от 27 августа 2006 года.Перепишите его, заменив предложения прямой речи на отчетную. Остальные предложения оставьте без изменений.

«Почему ты хочешь знать мой возраст? Если люди узнают, что я такой старый, у меня не будет работы!» смеется 90-летний А. К. Хангал, один из самых известных характерных актеров хинди. Для своих лет он довольно энергичный. «В чем секрет?» мы просим. «Я принимаю все в небольших количествах. И я много хожу», — отвечает он. «Я пришел в индустрию, когда люди вышли на пенсию. Мне было за 40. Так что я не скучаю по тому, что меня называют звездой.Меня по-прежнему уважают и дают работу, когда актеры моего возраста живут в бедности и без работы. У меня нет никаких жалоб », — говорит он, добавляя, -« но да, мне всегда недоплачивали ». Получатель Падма Бхушан, Хангал никогда не стремился к деньгам или материальной выгоде.« Без сомнения, сегодня я доволен, но деньги это важно. Я был дураком, если раньше не понимал ценности денег «, — сожалеет он.

A. 90-летний А. К. Хангал, один из самых известных персонажей кинематографа хинди, рассмеялся, когда спросил нас, почему мы хотели знать его возраст.Он чувствовал, что никто не даст ему работу, если узнают, что он такой старый. Для своих лет он довольно энергичный. Мы спросили его, в чем секрет его энергичности. Он ответил, что все ест в небольших количествах и много гуляет. Ему было за сорок, когда он присоединился к отрасли, — возраст, в котором многие люди уходят с работы. Он не скучает, когда его называют звездой. Его уважают, ему дают работу, в то время как некоторые актеры его возраста живут в бедности и им нечего делать. Он добавляет, что у него нет никаких жалоб, но добавляет, что ему всегда недоплачивали.Получивший Падма Бхушан, Хангал никогда не стремился к деньгам или материальной выгоде. Он сожалеет, что, без сомнения, доволен сегодня, но деньги важны. Он был глупцом, если раньше не понимал ценности денег.

Вопросы MCQ предложения

Важные вопросы Видео Ссылки

νακαλύφθηκε νέα μαγνητική φάση σε υπεραγωγούς με βάση το σίδηρο — πιστήμη

Οι επιστήμονες της Аргоннская ανακάλυψαν μια νέα μαγνητική φάση σε υπεραγωγούς με βάση το σίδηρο, ρίχνοντας φως σε μια συζήτηση σχετικά με τις αλληλεπιδράσεις μεταξύ ατόμων και ηλεκτρονίων που είναι υπεύ

Детальные описания

Οι επιστήμονες της Аргоннская ανακάλυψαν μια νέα μαγνητική φάση σε υπεραγωγούς με βάση το σίδηρο, ρίχνοντας φως σε μια συζήτηση σχετικά με τις αλληλεπιδράσεις μεταξύ ατόμων και ηλεκτρονίων που είναι υπεύθυνα για την ασυνήθιστη υπεραγωγιμότητα τους.

Επιστήμονες στο Εθνικό Εργαστήριο Аргон του Υπουργείου Ενέργειας των ΗΠΑ ανακάλυψαν μια προηγουμένως άγνωστη φάση σε μια κατηγορία υπεραγωγών που ονομάζονται αρσενίδια σιδήρου. Υτό ρίχνει φως σε μια συζήτηση για τις αλληλεπιδράσεις μεταξύ ατόμων και ηλεκτρονίων που είναυυυςυόανανατητγσιασιαρωτογποιασιασιατρονατγασιασιατρωτα

«Αυτή η νέα μαγνητική φάση, η οποία δεν έχει παρατηρηθεί ποτέ πριν, θα μπορούσε να έχει σημαντικές επιπτώσεις στην κατανόηση της μη συμβατικής υπεραγωγιμότητας», δήλωσε ο Ray Osborn, φυσικός της Аргон και συγγραφέας στο χαρτί.

ι επιστήμονες και οι μηχανικοί γοητεύονται από τους υπεραγωγούς επειδή είναι ικλανοί ναμειδή είναι ικληοί ναμεαεεναι ικληοί ναμετασηκτμταρκτκτμτασκρτκτμμετασηκτκτμταρκτρκτμταμετασηκτντμ Αυτό είναι μοναδικό μεταξύ όλων των αγωγών: ακόμη και καλοί, όπως τα χάλκινα καλώδια που χρησιμοποιούνται στα περισσότερα καλώδια τροφοδοσίας, χάνουν ενέργεια στο δρόμο.

Γιατί λοιπόν δεν χρησιμοποιούμε υπεραγωγούς για κάθε ηλεκτροφόρο καλώδιο στη χώρα; Το μεγαλύτερο μειονέκτημά τους είναι ότι πρέπει να κρυώσουν σε πολύ, πολύ κρύες θερμοκρασυίεςεια οτργια οναναναναναναναναναναναναναναλια.Πίσης, δεν καταλαβαίνουμε πλήρως πώς λειτουργούν οι νεότεροι τύποι, που ονομάζονται μη συμβατικοί. Οι ερευνητές ελπίζουν ότι με την εξεύρεση της θεωρίας πίσω από αυτούς τους υπεραγωγούς, θα μπορούσαμε να αυξήσουμε τη θερμοκρασία στην οποία λειτουργούν και να αξιοποιήσουν τη δύναμή τους για ένα ευρύ φάσμα νέων τεχνολογιών.

θεωρία πίσω από παλαιότερους, «συμβατικούς» υπεραγωγούς είναι αρκετά καλά κατανοητή. Ζεύγη ηλεκτρονίων, τα οποία συνήθως απωθούν το ένα το άλλο, αντίθετα συνδέονται μεταξύ τους παραμορφώνοντας τα άτομα γύρω τους και βοηθούν το ένα το άλλο να ταξιδέψει μέσα από το μέταλλο.(Σε έναν απλό παλιό αγωγό, αυτά τα ηλεκτρόνια αναπηδούν από τα άτομα, παράγοντας θερμότητα). Στους «μη συμβατικούς» υπεραγωγούς, τα ηλεκτρόνια εξακολουθούν να σχηματίζουν ζεύγη, αλλά δευν ξέροδυςετινι.

ι υπεραγωγοί είναι ιδιαίτερα λεπτοί. για να φτάσουν στη φάση υπεραγωγιμότητας — που ηλεκτρική ενέργεια ρέει ελεύθερα — χρειάζονται πολιλκ κ. Τα αρσενίδια σιδήρου που μελετήθηκαν οι ερευνητές είναι συνήθως μαγνητικά, αλλά καθώς προσθέτετε νάτριο στο μείγμα, ο μαγνητισμός καταστέλλεται και τα υλικά τελικά γίνονται υπεραγωγικά κάτω από περίπου -400 βαθμούς Φαρενάιτ.

μαγνητική σειρά επηρεάζει επίσης την ατομική δομή. Σε θερμοκρασία δωματίου, τα άτομα σιδήρου κάθονται σε ένα τετράγωνο πλέγμα, το οποίο έχει τετραπλάσια συμμετρία, αλλά όταν ψύχεται κάτω από τη θερμοκρασία μαγνητικής μετάβασης, παραμορφώνονται για να σχηματίσουν ένα ορθογώνιο πλέγμα, με μόνο διπλάσια συμμετρία. Αυτό μερικές φορές ονομάζεται «νηματική σειρά». Εωρήθηκε τι αυτή η νηματική σειρά παραμένει έως ότου το υλικό γίνει υπεραγωγικό — μέχρι αυτόεο αποτέ.

ο ομάδα Argonne ανακάλυψε μια φάση όπου το υλικό επιστρέφει σε τετραπλάσια συμμετρία, αντί γιαυαυαυαξαξανττηγατηγατητ(Δείτε το διάγραμμα).

«Είναι ορατό χρησιμοποιώντας περίθλαση σκόνης νετρονίων, η οποία είναι εξαιρετικά ευαίσθητη, αλλά την οποία μπορείτε να εκτελέσετε μόνο σε αυτήν την ανάλυση σε πολύ λίγα μέρη στον κόσμο», δήλωσε ο Osborn. Περίθλαση της σκόνης νετρονίων αποκαλύπτει τόσο τις θέσεις των ατόμων όσο και τις κατευθύνσεις τοσπονκικτοκτκτοκτοκτκτοκτκτοκικτρονκτοκτοκτρονκτοκτρονκτρονκτοκτρονκτοκτρονκτοκτονκτρονκτρον

Ο λόγος για τον οποίο η ανακάλυψη της νέας φάσης είναι ενδιαφέρουσα είναι ότι μπορεί να βοηθήσει στην επίλυση μιας μακροχρόνιας συζήτησης σχετικά με την προέλευση της φυσικής τάξης.Οι θεωρητικοί υποστηρίζουν ότι προκαλείται από μαγνητισμό ή από τροχιακή σειρά.

τροχιακή εξήγηση υποστηρίζει ότι τα ηλεκτρόνια θέλουν να κάθονται σε συγκεκριμέηληληα τροχιακά οποηγαναγαναγανανατγανατγανατγανατγανατγαναγανατγαναναγανατρονασπονα, σπονα Τα μαγνητικά μοντέλα, από την άλλη πλευρά (που αναπτύχθηκαν από τους συν-συγγραφείς της μελέτης Илья Еремин και Андрей Чубуков στο Institut для г Theoretische Physik στη Γερμανία και το Πανεπιστήμιο του Ουισκόνσιν-Μάντισον, αντίστοιχα) υποδηλώνουν ότι οι μαγνητικές αλληλεπιδράσεις είναι αυτές που οδηγούν τη διπλή συμμετρία– και ότι είναι το κλειδί για την ίδια την υπεραγωγιμότητα.Σως αυτό που συνδέει τα ζεύγη ηλεκτρονίων σε υπεραγωγούς σιδήρου αρσενικού είναι ο μαγνητισμός.

«ι τροχιακές θεωρίες δεν προβλέπουν επιστροφή σε τετραπλάσια συμμετρία σε αυτό το σηλαακές θεωρίες δεν προβλέπουν επιστροφ σετραπλάσια συμμεακές σε αυτό το σηλαηο», δλονε ογτανε ογτανε

«Μέχρι στιγμής, αυτό το φαινόμενο έχει παρατηρηθεί μόνο πειραματικά σε αυτές τις ενώσεις με νάτριο», είπε, «αλλά πιστεύουμε ότι παρέχει στοιχεία για μια μαγνητική εξήγηση της νηματικής τάξης στα αρσενίδια σιδήρου γενικά».

Θα μπορούσε επίσης να επηρεάσει την κατανόησή μας για την υπεραγωγιμότητα σε άλλους τύπους υπεραγωγών, όπως τα οξείδια του χαλκού, όπου έχουν παρατηρηθεί και φυσικές παραμορφώσεις, είπε ο Осборн.

ο ρθρο, με τίτλο «αγνητικά καθοδηγούμενη καταστολή της νηματικής τάξης σε ναν υπεραγωγοη σε ναν υπεραγωγοηε ναν υπεραγωγόοημε.

Άλλοι συντάκτες στο χαρτί ήταν οι επιστήμονες της Аргон Севда Avci (τώρα στο Πανεπιστήμιο AFYON Коджатепе στην Τουρκία), ο Омар Chmaissem (από κοινού ραντεβού με το Πανεπιστήμιο του Βόρειου Ιλινόις), ο Джаред M.Allred, Стефан Розенкранца, Даниэль Bugaris, Дак Янг Чанг, Джон-Пол Кастеллан, Джон Шлютер, Гельмут Клаус и Меркоури Канатзидис (από κοινού ραντεβού με το Πανεπιστήμιο Северо-запад).και Дмитрий Халявин, Паскаль Мануэль και Азиз Дауд-Аладин στο Источник импульсных нейтронов и мюонов ISIS στο Лаборатория Резерфорда Эпплтона στο Оксфордшир, Ηνωμένο ασίλειο.

χρηματοδότηση για την έρευνα δόθηκε από το Γραφείο Επιστημών του Υπουργείου Ενέργειας των ΗΠΑ.

By РазноеLeave a Comment on А чубуков на обочине: Заготовка черенков (чубуков) винограда осенью для посадки

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *